α-1 Гликопротеиновые кислоты

alpha-1 Glycoprotein acid

Количественное определение α-1 кислого гликопротеина в сыворотке и плазме иммунотурбидиметрическим методом
КОЛИЧЕСТВО в наборе:      N по каталогу 11135 D                                  110 мл

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Повышение уровня α-1 кислого гликопротеина в крови может наблюдаться при воспалительных процессах, а также при некрозе опухолей. Определение уровня α-1 кислого гликопротеина используется при диффе­ренциальной диагностике острой реактивной фазы заболевания (подъем уровня в сыворотке) и эффекта влияния эстрогенов (нормальный или пониженный уровень).

МЕТОД

Определение α-1 кислого гликопротеина основано на специфическом взаимодействии между антителами к α-1 кислому гликопротеину поликлональной антисыворотки и соответствующим антигеном при оптималь­ном рН в присутствии ПЭГ. Мутность раствора, возникающая в результате образования комплекса, прямо пропорциональна концентрации α-1 кислого гликопротеина в пробе.

СОСТАВ НАБОРА

1. Реагент А      2 х 50мл

Фосфатный буфер, рН = 7,5   20 ммоль/л
ПЭГ                                                         <7%

Хлорид натрия                                    150 ммол/л

Азид натрия                                         <0,1%

2. Реагент В      2 х 1мл

Поликлональные антитела к α-1 кислому гликопротеину
Азид натрия                                         <0,1%

3. Реагент С      1 х 10 мл

Буфер Гуддса, рН = 7,5                     50 ммоль/л

Хлорид натрия                                    150 ммол/л

Азид натрия                                         <0,1%

4. Пустой флакон на 20 мл для приготовления рабочего раствора ВС может быть использован для
установки на некоторых типах автоанализаторов.

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ

Реагент А готов к применению. В нераспечатанном флаконе реагент стабилен вплоть до указанной даты при хранении 2...8°С. После вскрытия реагент сохраняет стабильность в течение 120 дней при 2...8°С. Раствор ВС: Смешайте 1 часть реагента В и 3 части реагента С. Тщательно перемешайте не допуская вспенивания. Раствор стабилен в течение 60 дней при хранении 2...8°С.

Стабильность реагентов и растворов обеспечивается при отсутствии загрязнения. Флаконы закрывайте крышками сразу после использования.

КАЛИБРОВКА

Для калибровки рекомендуется использовать калибратор плазменных белков Plasmaproteins Cal Кат.№ 11200 D (3х1 мл) жидкая форма. Для построения калибровочной зависимости следует приготовить 5 после­довательных разведений калибратора, как указано в таблице.

Добавить в кюветы, мкл	Разведение калибратора
	1	2	3	4	5
Калибратор	200	-	-	-	-
Физ. раствор	800	300	300	300	300
Разведение 1 калибратора	-	300	-	-	-
Разведение 2 калибратора	-	-	300	-	-
Разведение 3 калибратора	-	-	-	300	-
Разведение 4 калибратора	-	-	-	-	300
Полученное разведение	1:5	1:10	1:20	1:40	1:80
Концентрация с учетом раз­ведения пробы 1:21	4,2 х [С]	2,1 х [С]	1,05 х [С]	0,525 х [С]	0,2625 х [С]

[С] - концентрация α-1 кислого гликопротеина в калибраторе Plasmaproteins Cal.

В отличие от проб и контрольных материалов, калибратор не требуется предварительно разводить в отно­шении 1:21.

ПРОБЫ

Сыворотка, плазма (гепарин, ЭДТА).

Стабильность: 3 дня при температуре хранения 2...8°С.

Перед проведением анализа пробы пациентов и контрольные материалы разводятся физиологическим раствором в отношении 1:21 (1v + 20v).

УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЯ

Длина волны: 340 (334-365) нм

Оптический путь: 1 см

Температура: 37°С

Измерение: по конечной точке (увеличение оптической плотности)

СХЕМА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до 37°С. Температура должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение всего определения.

Добавить в кюветы (мкл)	Холостая проба	Калибровочная проба	Опытная/контрольная проба
Физиологический раствор	50	-	-
Калибратор (разведения 1-5)	-	50	-
Разведенная проба/контроль	-	-	50
Реагент А	900	900	900
Раствор ВС	100	100	100

Осторожно перемешать, инкубировать 10 минут при 37°С. Измерить оптическую плотность разведений ка­либратора, проб и контрольных материалов против холостой пробы.

Пропорциональное изменение объемов реагентов и пробы не влияет на конечный результат.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

Построить калибровочную зависимость, откладывая по оси Х значения концентраций для каждого разведе­ния калибратора, а по оси Y - значения оптической плотности соответствующего разведения. Концентрация в пробах определяется при помощи калибровочного графика по значению оптической плот­ности пробы.

ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ

Диапазон измерений 20 - 600 мг/дл. Если концентрация α-1 кислого гликопротеина в пробе превышает 600 мг/дл, разбавьте исходную пробу физиологическим раствором и повторите исследование. Полученный ре­зультат умножьте на коэффициент разведения. Нижний предел определения 8 мг/дл. Эффект прозоны не наблюдается вплоть до концентрации 1900 мг/дл.

РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ

Сыворотка / плазма: 50 - 120 мг/дл

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для проведения контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованными для этого метода значениями α-1 кислого гликопротеина.

ПРИМЕЧАНИЯ

1.   На результат теста не влияет присутствие в пробе гемоглобина в концентрации до 5,0 г/л, билирубина в концентрации до 512 мкмоль/л, триглицеридов в концентрации до 17,1 ммоль/л и ревматоидного фак­тора до 1000 МЕ/л.

Информация для заказа

Область использования: Белки плазмы	Производство:	Sentinel
	Метод:	турбидиметрия
	Объем:	2x50;2x4
	Кат. номер:	S/11135D
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: α-1 Гликопротеиновые кислоты / alpha-1 Glycoprotein acid . Примечание: