C4

Количественное определение С4 компонента комплемента в сыворотке и плазме иммунотурбидиметриче-ским методом

КОЛИЧЕСТВО в наборе:      N по каталогу 11062 D                                  110 мл

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Определение уровня С4 компонента комплемента используется для диагностики и при лечении различных патологий, таких как заболевания иммунной системы, системная красная волчанка, аутоиммунный тиреои-дит, юношеский дерматомиозит, бактериальный и вирусный менингит, стрептококковая и стафилококковая инфекции, пневмония.

МЕТОД

Определение С4 основано на специфическом взаимодействии между поликлональными антителами к С4 антисыворотки и соответствующим антигеном при оптимальном рН в присутствии ПЭГ. Мутность раствора, возникающая в результате образования комплекса, прямо пропорциональна концентрации С4 в пробе.

СОСТАВ НАБОРА

1. Реагент А      2 х 50 мл

Фосфатный буфер, рН = 7,5   20 ммоль/л
ПЭГ                                                         >5%

Хлорид натрия                                    150 ммол/л

Азид натрия                                         <0,1%

2. Реагент В      2 х 1 мл

Поликлональные антитела к С4
Азид натрия                                         <0,1%

3. Реагент С      1 х 10 мл

Буфер Гуддса, рН = 7,5                     50 ммоль/л

Хлорид натрия                                    150 ммол/л

Азид натрия                                         <0,1%

4. Пустой флакон на 20 мл для приготовления рабочего раствора ВС может быть использован для
установки на некоторых типах автоанализаторов.

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ

Реагент А готов к применению. В нераспечатанном флаконе реагент стабилен вплоть до указанной даты при хранении 2...8°С. После вскрытия реагент сохраняет стабильность в течение 120 дней при 2...8°С. Раствор ВС: Смешайте 1 часть реагента В и 3 части реагента С. Тщательно перемешайте не допуская вспенивания. Раствор стабилен в течение 60 дней при хранении 2...8°С

Стабильность реагентов и растворов обеспечивается при отсутствии загрязнения. Флаконы закрывайте крышками сразу после использования.

КАЛИБРОВКА

Для калибровки рекомендуется использовать калибратор плазменных белков Plasmaproteins Cal Кат.№ 11200 D (3х1 мл) жидкая форма. Для построения калибровочной зависимости следует приготовить 5 после­довательных разведений калибратора, как указано в таблице.

 

Добавить в кюветы, мкл		Разведения калибратора
	1	2	3	4	5
Калибратор	200	-	-	-	-
Физ. раствор	800	300	300	300	300
Разведение 1 калибратора	-	300	-	-	-
Разведение 2 калибратора	-	-	300	-	-
Разведение 3 калибратора	-	-	-	300	-
Разведение 4 калибратора	-	-	-	-	300
Полученное разведение	1 : 5	1 : 10	1 : 20	1 : 40	1 : 80
Концентрация с учетом раз­ведения пробы 1:21	4,2 х [С]	2,1 х [С]	1,05 х [С]	0,525 х [С]	0,262 х [С]

С] - концентрация С4 в калибраторе Plasmaproteins Cal.

В отличие от проб и контрольных материалов, калибратор не требуется предварительно разводить в отно­шении 1:21.

ПРОБЫ

Сыворотка, плазма (гепарин, ЭДТА). Стабильность: 8 дней при хранении 2...8°С.

Перед проведением анализа пробы пациентов и контрольные материалы разводятся физиологическим раствором в отношении 1:21 (1v + 20v).

УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЯ

 Длина волны: 340 (334-365) нм

Оптический путь: 1 см

Температура: 37°С

Измерение: по конечной точке (увеличение оптической плотности)

СХЕМА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до 37°С. Температура должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение всего определения.

Добавить в кюветы (мкл)	Холостая проба	Калибровочная проба	Опытная/контрольная проба
Физиологический раствор	200	-	-
Калибратор (разведения 1-5)	-	200	-
Разведенная проба/контроль	-	-	200
Реагент А	900	900	900
Раствор ВС	100	100	100

Осторожно перемешать, инкубировать 10 минут при 37°С. Измерить оптическую плотность разведений ка­либратора, проб и контрольных материалов против холостой пробы.

Пропорциональное изменение объемов реагентов и пробы не влияет на конечный результат.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

Построить калибровочную зависимость, откладывая по оси Х значения концентраций для каждого разведе­ния калибратора, а по оси Y - значения оптической плотности соответствующего разведения. Концентрация в пробах определяется при помощи калибровочного графика по значению оптической плот­ности пробы.

ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ

Диапазон измерений 5 - 200 мг/дл. Если концентрация С4 в пробе превышает 200 мг/дл, разбавьте исход­ную пробу физиологическим раствором и повторите исследование. Полученный результат умножьте на ко­эффициент разведения.

Эффект прозоны не наблюдается вплоть до концентрации 470 мг/дл.

РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ

Сыворотка / плазма:  10 - 40 мг/дл

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для проведения контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованными для этого метода значениями С4.

ПРИМЕЧАНИЯ

• 1. На результат теста не влияет присутствие в пробе гемоглобина в концентрации до 4,5 г/л, билирубина в концентрации до 512 мкмоль/л, триглицеридов в концентрации до 17,1 ммоль/л и ревматоидного фак­тора до 600 МЕ/мл.
• 2. Моноклональная сывороточная гаммапатия IgA- или IgE-типа может влиять на результат измерения С4.

Информация для заказа

Область использования: Белки плазмы	Производство:	Sentinel
	Метод:	турбидиметрия
	Объем:	2x50;2x4
	Кат. номер:	11062D
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: C4. Примечание: