Каппа легкие цепи (сыворотка) Kappa light chains (serum and plasma)

Kappa light chains (serum/urine)

В норме у здоровых лиц соотношение между каппа и лямбда цепями в сыворотке крови составляет примерно 2:1. В случае моноклональной гамапатии это соотношение нарушается за счет увеличения клеточного клона, синтезирующего большое количество гомогенных свободных легких цепей.

Фасовка (фл х мл): R1 2х50; R2 2х10

Материал: Сыворотка или плазма (гепарин, ЭДТА)

Метод измерения: Количественный иммунотурбидиметрический метод

Адаптации: Hitachi 911, Siemens Advia, Dimension, Konelab 30-60, Mindray BS-800, Ortho Vitros

Дополнительные материалы и аналиты:

Калибратор белки плазмы REF 11200D 3x1 мл
Иммуноконтроль 1 REF 11210 1x5 мл
Иммуноконтроль 2 REF 11212 1x5 мл
Иммуноконтроль (2 уровня) REF 11211A 2x(2x1) мл

Количественное определение свободных и связанных легких цепей каппа в сыворотке и плазме иммуно-турбидиметрическим методом
КОЛИЧЕСТВО в наборе: N по каталогу 11004 D 120 мл

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

В норме отношение содержания в сыворотке каппа и лямбда легких цепей примерно равно 2:1. При моно-клональной гаммапатии это отношение изменяется вследствие увеличения клеточного пула, продуцирующего большое количество свободных легких цепей только одного определенного типа.

МЕТОД

Определение легких цепей каппа основано на специфическом взаимодействии между антителами к легким цепям каппа поликлональной антисыворотки и соответствующим антигеном при оптимальном рН в присутствии ПЭГ. Мутность раствора, возникающая в результате образования комплекса, прямо пропорциональна концентрации легких цепей каппа в пробе.

СОСТАВ НАБОРА

1. Реагент А 2 х 50 мл

Фосфатный буфер, рН = 7,5 20 ммоль/л

ПЭГ < 7%

Хлорид натрия 150 ммоль/л

Азид натрия <0,1%

2. Реагент В 2 х 10 мл
Поликлональные антитела к легким цепям каппа
Азид натрия <0,1%

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ

Реагент А и Реагент В готовы к применению. В нераспечатанном флаконе реагенты стабильны вплоть до указанной даты при хранении 2...8°С. После вскрытия реагенты сохраняют стабильность в течение 120 дней при 2...8°С.

Стабильность реагентов обеспечивается при отсутствии загрязнения. Флаконы закрывайте крышками сразу после использования.

КАЛИБРОВКА

Для калибровки рекомендуется использовать калибратор плазменных белков Plasmaproteins Cal Кат.№ 11200 D (3х1 мл) жидкая форма. Для построения калибровочной зависимости следует приготовить 5 последовательных разведений калибратора, как указано в таблице.

Добавить в кюветы, мкл	Разведения калибратора
Добавить в кюветы, мкл	1	2	3	4	5
Калибратор	200	-	-	-	-
Физ. раствор	800	300	300	300	300
Разведение 1 калибратора	-	300	-	-	-
Разведение 2 калибратора	-	-	300	-	-
Разведение 3 калибратора	-	-	-	300	-
Разведение 4 калибратора	-	-	-	-	300

Полученное разведение	1 : 5	1 : 10	1 : 20	1 : 40	1 : 80
Концентрация с учетом разведения пробы 1:21	4,2 х [С]	2,1 х [С]	1,05 х [С]	0,525 х [С]	0,2625 х [С]

[С] - концентрация легких цепей каппа в калибраторе Plasmaproteins Cal.

ПРОБЫ

Сыворотка, плазма (гепарин, ЭДТА).

Стабильность: 4 дня при температуре хранения 2...8°С.

Перед проведением анализа пробы пациентов и контрольные материалы разводятся физиологическим раствором в отношении 1:21 (1v + 20v).

УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЯ

Длина волны : 340 (334-365) нм

Оптический путь : 1 см

Температура : 37°С

Измерение : по конечной точке (увеличение оптической плотности)

СХЕМА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до 37°С. Температура должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение всего определения.

Добавить в кюветы (мкл)	Холостая проба	Калибровочная проба	Опытная/контрольная проба
Физиологический раствор	20	-	-
Калибратор (разведения 1-5)	-	20	-
Разведенная проба/контроль	-	-	20
Реагент А	700	700	700
Реагент В	150	150	150

Осторожно перемешать, инкубировать 10 минут при 37°С. Измерить оптическую плотность разведений калибратора, проб и контрольных материалов против холостой пробы.

Пропорциональное изменение объемов реагентов и пробы не влияет на конечный результат.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

Построить калибровочную зависимость, откладывая по оси Х значения концентраций для каждого разведения калибратора, а по оси Y - значения оптической плотности соответствующего разведения. Концентрация в пробах определяется при помощи калибровочного графика по значению оптической плотности пробы.

ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ

Диапазон измерений 70 - 1600 мг/дл. Если концентрация в пробе превышает 1600 мг/дл, разбавьте исходную пробу физиологическим раствором и повторите исследование. Полученный результат умножьте на коэффициент разведения. Нижний предел определения 4 мг/дл. Эффект прозоны не наблюдается вплоть до концентрации 5600 мг/дл.

РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ

Сыворотка

Каппа	Лямбда	Отношение каппа/лямбда
140 - 380 мг/дл	95 - 245 мг/дл	1.17 - 2.93

Каждая лаборатория должна самостоятельно уточнять границы референтного диапазона. Полученный результат должен всегда оцениваться в совокупности с данными истории болезни и клиническим состоянием пациента.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для проведения контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованными для этого метода значениями каппа легких цепей.

ПРИМЕЧАНИЯ

На результат теста не влияет присутствие в пробе гемоглобина в концентрации до 3,0 г/л, билирубина в концентрации до 512 мкмоль/л, триглицеридов в концентрации до 11,4 ммоль/л и ревматоидного фактора в концентрации до 300 МЕ/мл.

Информация для заказа

Область использования: Белки плазмы	Производство:	Sentinel
	Метод:	турбидиметрия
	Объем:	Фасовка (фл х мл): R1 2х50; R2
	Кат. номер:	11004D
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: Каппа легкие цепи (сыворотка) Kappa light chains (serum and plasma) / Kappa light chains (serum/urine). Примечание: æ-легкие цепи (сыворотка/моча)