C3
Количественное определение С3 компонента комплемента в сыворотке и плазме иммунотурбидиметриче-ским методом
КОЛИЧЕСТВО в наборе: N по каталогу 11060 D 110 мл
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Определение уровня С3 компонента комплемента используется для дифференциальной диагностики и при лечении острых воспалительных заболеваний, таких как гломерулонефрит, ревматоидный артрит и бактериальные инфекции.
МЕТОД
Определение С3 основано на специфическом взаимодействии между поликлональными антителами к С3 антисыворотки и соответствующим антигеном при оптимальном рН в присутствии ПЭГ. Мутность раствора, возникающая в результате образования комплекса, прямо пропорциональна концентрации С3 в пробе.
СОСТАВ НАБОРА
1. Реагент А 2 х 50 мл
Фосфатный буфер, рН = 7,5 20 ммоль/л
ПЭГ >5%
Хлорид натрия 150 ммол/л
Азид натрия <0,1%
2. Реагент В 2 х 1 мл
Поликлональные антитела к С3
Азид натрия <0,1%
3. Реагент С 1 х 10 мл
Буфер Гуддса, рН = 7,5 50 ммоль/л
Хлорид натрия 150 ммол/л
Азид натрия <0,1%
4. Пустой флакон на 20 мл для приготовления рабочего раствора ВС может быть использован для
установки на некоторых типах автоанализаторов.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Реагент А готов к применению. В нераспечатанном флаконе реагент стабилен вплоть до указанной даты при хранении 2...8°С. После вскрытия реагент сохраняет стабильность в течение 120 дней при 2...8°С. Раствор ВС: Смешайте 1 часть реагента В и 3 части реагента С. Тщательно перемешайте не допуская вспенивания. Раствор стабилен в течение 60 дней при хранении 2...8°С
Стабильность реагентов и растворов обеспечивается при отсутствии загрязнения. Флаконы закрывайте крышками сразу после использования.
КАЛИБРОВКА
Для калибровки рекомендуется использовать калибратор плазменных белков Plasmaproteins Cal Кат.№ 11200 D (3х1 мл) жидкая форма. Для построения калибровочной зависимости следует приготовить 5 последовательных разведений калибратора, как указано в таблице.
Добавить в кюветы, мкл
|
|
Разведения калибратора
|
|
1
|
2
|
3
|
4
|
5
|
Калибратор
|
100
|
-
|
-
|
-
|
-
|
Физ. раствор
|
900
|
300
|
300
|
300
|
300
|
Разведение 1 калибратора
|
-
|
300
|
-
|
-
|
-
|
Разведение 2 калибратора
|
-
|
-
|
300
|
-
|
-
|
Разведение 3 калибратора
|
-
|
-
|
-
|
300
|
-
|
Разведение 4 калибратора
|
-
|
-
|
-
|
-
|
300
|
|
Полученное разведение
|
1 : 10
|
1 : 20
|
1 : 40
|
1 : 80
|
1 : 160
|
Концентрация с учетом разведения пробы 1:21
|
2,1 х [С]
|
1,05 х [С]
|
0,525 х [С]
|
0,262 х [С]
|
0,131 х [С]
|
[С] - концентрация С3 в калибраторе Plasmaproteins Cal.
В отличие от проб и контрольных материалов, калибратор не требуется предварительно разводить в отношении 1:21.
ПРОБЫ
Сыворотка, плазма (гепарин). Стабильность: 8 дней при хранении 2...8°С.
Перед проведением анализа пробы пациентов и контрольные материалы разводятся физиологическим раствором в отношении 1:21 (1v + 20v).
УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЯ
Длина волны: 340 (334-365) нм
Оптический путь: 1 см
Температура: 37°С
Измерение: по конечной точке (увеличение оптической плотности)
СХЕМА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до 37°С. Температура должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение всего определения
Добавить в кюветы (мкл)
|
Холостая проба
|
Калибровочная проба
|
Опытная/контрольная проба
|
Физиологический раствор
|
100
|
-
|
-
|
Калибратор (разведения 1-5)
|
-
|
100
|
-
|
Разведенная проба/контроль
|
-
|
-
|
100
|
Реагент А
|
900
|
900
|
900
|
Раствор ВС
|
100
|
100
|
100
|
Осторожно перемешать, инкубировать 10 минут при 37°С. Измерить оптическую плотность калибраторов, проб и контрольных материалов против холостой пробы.
Пропорциональное изменение объемов реагентов и пробы не влияет на конечный результат.
ВЫЧИСЛЕНИЕ
Построить калибровочную зависимость, откладывая по оси Х значения концентраций для каждого разведения калибратора, а по оси Y - значения оптической плотности соответствующего разведения. Концентрация в пробах определяется при помощи калибровочного графика по значению оптической плотности пробы.
ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ
Диапазон измерений 20 - 500 мг/дл. Если концентрация С3 в пробе превышает 500 мг/дл, разбавьте исходную пробу физиологическим раствором и повторите исследование. Полученный результат умножьте на коэффициент разведения.
Эффект прозоны не наблюдается вплоть до концентрации 3500 мг/дл.
РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ
Сыворотка / плазма: 90 - 180 мг/дл
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для проведения контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованными для этого метода значениями С3.
ПРИМЕЧАНИЯ
- 1. На результат теста не влияет присутствие в пробе гемоглобина в концентрации до 5 г/л, билирубина в концентрации до 512 мкмоль/л, триглицеридов в концентрации до 17,1 ммоль/л и ревматоидного фактора до 600 МЕ/мл.
- 2. Моноклональная сывороточная гаммапатия IgA- или IgE-типа может влиять на результат измерения С3.
Информация для заказа
Область использования: | Производство: | Sentinel |
Метод: | турбидиметрия |
Объем: | 2x50;2x4 |
Кат. номер: | 11060D |
Цена (с НДС 10%): | по запросу | В корзину |
Наименование: C3. Примечание: |