Система детекции UnoVue™ Peroxidase Mouse&Rabbit Kit на 1000 тестов

Система визуализации на 1000 тестов, в составе пероксидазный блок, протеиновый блок, антикроличьи/антимышиные антитела, полимер, ДАБ ,буфер

Каталожный номер:                UMR 1000PD (на 1000 тестов)

Применение: Это небиотиновая, 1-шаговая система визуализации для выявления антигенов в залитых парафином тканях и криостатных срезах. Система также может использоваться для мазков крови, клеточных мазков и препаратов клеток. Этот набор был разработан посредством прямого мечения иммуноглобулинов энзимами, используя собственную технологию гипермечения. Это позволяет получать стабильные и воспроизводимые результаты иммунного окрашивания для всех типов ядерных, цитоплазматических и мембранных антигенов различных тканей при значительно более низком фоновом окрашивании по сравнению с использованием биотинового и авидинового конъюгатов.

Мышиная/кроличья система UnoVue одинаково хорошо работает с IgG и IgM, как с моноклональными, так и с поликлональными антителами. Реагенты можно использовать как для ручного, так и для автоматического окрашивания.

Состав набора:

1. Пероксидазный блок 100 мл
2. Антимышиный/кроличий конъюгат пероксидаза/полимер 100 мл
3. Буфер для стабильного ДАБ+ 200 мл
4. Хромоген (стабильный ДАБ+) 5 мл
5. Пустой флакон для перемешивания ДАБ+ на 15 мл

Хранение При +2+8 ^оС, не замораживать

Срок годности: До 12 месяцев (см. на упаковке) 

Состав:

Во всех реагентах нет консервантов (азида и тимерозола). За исключением хромогена (стабильного ДАБ+) остальные реагенты готовы к использованию.

Требующиеся дополнительные реактивы (нет в наборе):

1. Ксилол или депарафинизирующий реактив.
2. Абсолютный спирт
3. Дистиллированная или деионизированная вода
4. Буфер Immuno Wash (кат.№ К 005)
5. Блокатор фонового окрашивания (предпочтительно кат.№ К 023)
6. Разбавитель первичных антител (кат.№ К 004)
7. Краситель
8. Среда для заключения (кат.№ К 002)

Приготовление рабочего раствора стабильного ДАБ+:

1. Внести в пробирку или пустой флакон для перемешивания 1 мл буфера для стабильного ДАБ+.
2. Добавить 1 каплю (около 20 μл) хромогена (стабильный ДАБ+). Тщательно перемешать.
3. Рабочий раствор можно использовать в течение 2 недель при хранении при +2+8 ^оС.
4. Утилизируйте неиспользованный раствор ДАБ+ в соответствии с правилами Вашего учреждения.

Предостережение: ДАБ классифицируется как возможный канцероген и может вызвать повреждение кожи при контакте. Используйте средства защиты и избегайте контакта с одеждой и кожей. При случайном попадании на кожу немедленно промойте водой.

Рекомендуемый протокол:

1. Парафиновые срезы ткани должны быть депарафинизированы ксилолом или другим реактивом с последующей регидратацией промывками в этаноле и воде.
2. Исследователь должен сам оптимизировать разведение и время инкубации для первичных антител.
3. Каждое иммунное окрашивание должно включать в себя положительный и отрицательный контроль, чтобы убедиться в правильной работе системы и для помощи в интерпретации результатов.

Контроли: 

Положительный контроль: образец ткани, который заведомо содержит нужный антиген и ранее давал положительное окрашивание.

Отрицательный контроль:

А) Используйте нормальную неиммунную сывороку того вида животного, от которого получены антитела.

Б) Замените соответствующую разновидность изотипного контроля животного для первичного антитела.

В) Используйте антитело, уже связанное с антигеном-мишенью.

Тканевой контроль – ткань, которая точно не содержит искомый антиген.

4. Уточните у производителя антител необходимость демаскации антигена. Проведите её до окрашивания.
5. С момента начала обработки среза не позволяйте ему высохнуть, т.к. может появиться нежелетельное фоновое окрашивание или артефакты.

Процедура окрашивания

1.Блокирование пероксидазы

1. Инкубация стекол в растворе блокатора пероксидазы (5 мин.).
2. Промойте стекла в буфере Immunо Wash 3 раза по 1 минуте (3х1 мин.).

2.Блокирование фонового окрашивания (рекомендуется) 

1. Добавьте 2 капли (100 µл) или нужный Вам объем раствора блокатора фоновой окраски так, чтобы покрыть весь срез (10 мин.).
2. Удалить/сбросить раствор. Не промывать.

3.Первичное антитело

1. Инкубируйте с первичным антителом, подготовленным в соответствии с рекомендациями его производителя (30-60 мин.). Концентраты антител можно развести разбавителем первичных антител.
2. Промойте стекла в буфере Immunо Wash 3 раза (3х1 мин.).

4.Полимер UnoVue 

1. Нанесите конъюгат пероксидазы с полимером и инкубируйте (15 мин.).
2. Промойте стекла в буфере Immunо Wash 3 раза (3х1 мин.).

5.Стабильный ДАБ+

1. Приготовьте рабочий раствор ДАБ+ (см. выше).
2. Инкубируйте срез с рабочим раствором (5-10 мин.). Следите за степенью окраски, чтобы определить оптимальное время.
3. Промойте стекла 3 раза водой (3х1 мин.).

6.Докраска

1. Инкубируйте срез с красителем (например, гематоксилином) – примерно 1 мин. Пользуйтесь рекомендациями производителя или используйте стандартную лабораторную методику.
2. Промойте срез 3 раза водой (3х1 мин.), затем 1 раз буфером Immuno Wash (1х1 мин.) и 1 раз водой (1х1 мин.).

7.Дегидратирование и нанесение покровного стекла

1.  Дегидратируйте ткань в разведениях этанола, а потом  ксилола.
2.  Нанесите покровное стекло со средой для заключения.

 

 

DBS will not be held responsible for patent infringement or other violation that may occur with the use of our product.

DBS 1020 Serpentine Lane, # 114, Pleasanton, CA 94566 Tel: 925 484 3350, Fax: 925 484 3390

                                                                Website: www.dbiosys.com e-mail: customersupport@dbiosys.com

Информация для заказа

Область использования: Антитела и расходные материалы DIAGNOSTIC BIOSYSTEMS	Производство:	DIAGNOSTIC BIOSYSTEMS
	Метод:
	Объем:	1000 tests
	Кат. номер:	UMR1000PD
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: Система детекции UnoVue™ Peroxidase Mouse&Rabbit Kit на 1000 тестов / Система визуализации на 1000 тестов, в составе пероксидазный блок, протеиновый блок, антикроличьи/антимышиные антитела, полимер, ДАБ ,буфер. Примечание: Клон: , тип: Ready To Use Immunostaining Kits