 |
| ||||||
| |||||||
| / Каталог / Молекулярная диагностика / ПЦР (Полимеразная цепная реакция) / Реагенты и тест-системы для ПЦР |
Реагенты для выделения нуклеиновых кислот
Исследования же нуклеиновых кислот, а именно – изучение методов выделения и очистки нуклеиновых кислот – осуществляют с целью определения тех или иных вариаций в структуре ДНК. Основа таких методов – это так называемая работа непосредственно с РНК и ДНК. А сами методы представлены сегодня электрофорезом, клонированием, секвенированием, гибридизаций и блот- гибридизаций, рекомбинацией, а также методом ПЦР. Процесс выделения нуклеиновых кислот заключается в получении чистого, свободного от примесей препарата ДНК или РНК, извлеченного из того или иного субстрата. Представленные в этом разделе наборы - это отработанные и оптимизированные методики, представленные в виде специально подобранного комплекта реагентов для выделения ДНК и РНК из биологического материала - крови, растений, животных, плазмидной и геномной ДНК бактерий, очистки продукта ПЦР реакции, извлечения ДНК из агарозного геля и других задач, связанных с подготовкой препаратов нуклеиновых кислот. Для подбора комплектации напишите запрос нашим менеджерам info@ld.ru Выделение нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) — это ключевой этап в молекулярной биологии, генетике и биохимии. Для этого используются различные реагенты и методы, которые позволяют изолировать нуклеиновые кислоты из клеток или тканей. Ниже приведены основные реагенты и их функции в процессе выделения нуклеиновых кислот:
1. Лизирующие буферы (Lysis Buffers) - Состав: Обычно содержат детергенты (например, SDS, Triton X-100), соли (например, NaCl) и буферные системы (например, Tris-HCl). - Функция: Разрушают клеточные мембраны и высвобождают нуклеиновые кислоты из клеток. Детергенты разрушают липидные мембраны, а соли стабилизируют нуклеиновые кислоты. 2. Протеазы (например, протеиназа K) - Функция: Расщепляют белки, включая гистоны и другие нуклеопротеины, что позволяет высвободить нуклеиновые кислоты из комплексов с белками. 3. Фенол-хлороформ - Функция: Используется для экстракции нуклеиновых кислот. Фенол и хлороформ помогают отделить нуклеиновые кислоты от белков и других клеточных компонентов. После центрифугирования нуклеиновые кислоты остаются в водной фазе, а белки — в органической. 4. Изопропанол или этанол - Функция: Используются для осаждения нуклеиновых кислот. После добавления изопропанола или этанола нуклеиновые кислоты выпадают в осадок, что позволяет их отделить от раствора. 5. Буферы для промывки (Wash Buffers) - Состав: Обычно содержат этанол или изопропанол в сочетании с солями (например, ацетатом натрия). - Функция: Удаляют примеси (белки, соли, липиды) из осадка нуклеиновых кислот. 6. Буферы для элюции (Elution Buffers) - Состав: Обычно это Tris-EDTA буфер (TE-буфер) или вода. - Функция: Используются для растворения осадка нуклеиновых кислот после выделения. 7. РНКазы и ДНКазы - Функция: Используются для удаления contaminating РНК (в случае выделения ДНК) или ДНК (в случае выделения РНК). Например, РНКаза A используется для удаления РНК из образцов ДНК. 8. Хелатирующие агенты (например, EDTA) - Функция: Связывают ионы металлов, которые могут активировать нуклеазы, разрушающие нуклеиновые кислоты. 9. Сорбенты (например, силикатные мембраны) - Функция: Используются в колоночных методах выделения. Нуклеиновые кислоты связываются с сорбентом, а затем элюируются. 10. Буферы для связывания (Binding Buffers) - Состав: Содержат хаотропные соли (например, гуанидин тиоцианат) и изопропанол. - Функция: Способствуют связыванию нуклеиновых кислот с сорбентами. 11. Буферы для удаления белков (Proteinase K Buffers) - Функция: Используются для деградации белков, что облегчает выделение нуклеиновых кислот. 12. Буферы для стабилизации РНК - Функция: Предотвращают деградацию РНК за счет ингибирования РНКаз.
Примеры коммерческих наборов для выделения нуклеиновых кислот:
Основные этапы выделения нуклеиновых кислот:
Эти реагенты и методы позволяют получить высококачественные нуклеиновые кислоты для последующих исследований, таких как ПЦР, секвенирование и другие молекулярно-биологические методы. Для подбора наборов под ваши задачи напишите нам info@ld.ru |
Выделение ДНК и РНК — важный шаг подготовки проб перед биохимическими и диагностическими процессами. Амплификация, проведение обратной транскрипции, детектирование накопления продуктов амплификации методом ПЦР в реальном времени, клонирование, секвенс, гибридизация, синтез ДНК и т. д., не могут быть выполнены непосредственно на биологических образцах без предварительного выделения (экстракции) нуклеиновых кислот (НК) и их последующей очистки.|
|
© ООО «Лабораторная Диагностика» info@LD.ru тел.: +7 495 369-20-43 |