Реагенты диагностические для биохимических исследований in vitro Бета-Гидроксибутират (В-Hydroxydutyrate FS), 100 мл
b-Гидроксибутират принадлежит к группе кетоновых тел и формируются в процессе жирового обмена путем восстановления ацетоацетата в печени. Кетоновые тела служат поставщиками энергии для различных тканей (сердца, почек, скелетной мускулатуры) особенно в случае инсулиновой недостаточности, инсулинрезистентности и при низких концентрациях глюкозы. После высвобождения кетоновых тел в кровь они быстро адсорбируются тканями, что приводит к снижению их концентрации в крови.
Метаболические ацидозы, вызванные увеличением концентрации b-гидроксибутирата, связаны с сахарным диабетом, врожденными метаболическими заболеваниями, алкоголизмом и голоданием.
Метод
Ферментативный тест по конечной точке.
Реагенты
Компоненты и их концентрации в реакционной смеси
Примечание: Концентрации приведены для окончательной тестовой смеси
R1:
|
Буфер, ммоль/л pH 8,4
|
115
|
|
β-гидроксибутиратдегидрогеназа, кЕд/л
|
≥3
|
|
Диафораза, кЕд/л
|
2,1
|
R2:
|
НАД, ммоль/л
|
21
|
|
Щавелевая кислота, ммоль/л
|
66
|
|
Нитросиний тетразолий, ммоль/л
|
1,7
|
Стабильность и хранение
Реагент стабилен до конца месяца, указанного в сроке годности, при хранении при 2 – 8 °C в защищённом от света месте. Не допускать загрязнений! Не замораживайте реагенты!
Меры предосторожности
- Реагенты содержат азид натрия (0,95 г/л) в качестве консерванта. Не глотать! Избегать попадания на кожу и слизистые оболочки!
- Предпринимать меры предосторожности, обычные при работе с лабораторными реактивами.
Обезвреживание отходов
В соответствии с местными правилами.
Подготовка реагентов
Реагент готов к использованию.
Примечание: После длительного хранения в холодильнике в Реагенте 2 может образовываться осадок бледно фиолетового цвета, который не влияет на определение, однако его следует растворить, слегка встряхивая флакон перед дальнейшим использованием.
Необходимые материалы, не включенные в набор:
• 0,9% раствор NaCl
• Общее лабораторное оборудование.
Исследуемые образцы
• Сыворотка или плазма.
Проводите измерение непосредственно после сбора крови. Если это невозможно, хранить образцы в холодильнике.
Стабильность:
1 месяц при 20–25°С
1 месяц при 2–8 °С
1 месяц при –20°С
Загрязнённые образцы хранению не подлежат.
Процедура определения
Длина волны, нм 546
Длина опт. пути, см 1
Температура, °C 37
Измерение относительно холостой
пробы
|
Холостая проба
|
Образец/
стандарт
|
Образец/стандарт, мкл
|
–
|
25
|
Дист. вода, мкл
|
25
|
–
|
Реагент 1, мкл
|
1000
|
1000
|
Перемешать, инкубировать 3–5 мин при 37°С, измерить абсорбцию А1, затем добавить:
|
Реагент 2, мкл
|
250
|
250
|
Перемешать, инкубировать точно 5 мин при 37°С. Измерить оптическую плотность А2.
|
|
|
|
|
А = (А2–А1)образца/стандарта
Расчёт
По стандарту
β-гидроксибутират [ммоль/л] = ´
´ Конц.станд. [ммоль/л]
Коэффициент пересчета
b- Гидроксибутират [мг/дл] х 0,096=
= b- Гидроксибутират [ммоль/л]
Калибраторы и контроли
Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и P.
|
Кат. №
|
Фасовка
|
TruLab N
|
5 9000 60 10 060
|
1´5 мл
|
TruLab P
ß-Hydroxybutyrate Standart FS
|
5 9050 60 10 060
1 3700 99 10 030
|
1´5 мл
1х3 мл
|
Рабочие характеристики
Диапазон измерений
Тест разработан для определения концентраций b-гидроксибутирата в диапазоне измерения от 0,01 до 6,9 ммоль/л. Если значение превосходит верхний предел этого диапазона, необходимо развести образец изотоническим раствором NaCl (0,9%) в соотношении 1+1 и полученный результат умножить на 2.
Специфичность/Помехоустойчивость
аскорбиновая кислота до 30 мг/дл, билирубин до 60 мг/дл, гемоглобин до 500 мг/дл и липемия до 2400 мг/дл триглицеридов не влияют на точность анализа. Добавление щавелевой кислоты к реагентам устраняет интерференцию с лактатом и лактатдегидрогеназой
Чувствительность/Предел определения
Нижний предел определения составляет 0,01 ммоль/л.
Воспроизводимость
(число измерений n = 20)
Образец
|
Среднеарифметическое значение, ммоль/л
|
SD, ммоль/л
|
CV, %
|
Внутрисерийная
|
Образец 1
|
0,30
|
0,004
|
1,31
|
Образец 2
|
0,75
|
0,008
|
1,02
|
Образец 3
|
1,13
|
0,006
|
0,53
|
Межсерийная
|
Образец 1
|
0,26
|
0,01
|
3,78
|
Образец 2
|
1,02
|
0,02
|
2,33
|
Образец 3
|
2,14
|
0,05
|
2,47
|
Сравнение методов
Сравнение реагента b-Hydroxybutirate FS DiaSys (y) и имеющихся в продаже тестов (x) с использованием 120 образцов дало следующие результаты:
y = 1,00x + 0,003 ммоль/л; r = 0,999
Референсные значения [1]
ммоль/л мг/дл
Натощак: 0,02- 0,27 0,21 – 2,81
Каждая лаборатория должна проверить применим ли контрольный диапазон величин к местному населению, и определить, при необходимости, свой собственный диапазон нормальных величин.
Литература
- Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 155-60.
- Sacks DB. Carbohydrate. In: Burtis CA., Ashwood ER., editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3ed Edi. Philadelphia: W.B. Saunders Company; 1999. p. 785- 787.
- Data on file at DiaSys Diagnostic Systems GmbH.
Изготовитель
DiaSys Diagnostic Systems GmbH
Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany
Информация для заказа
Область использования: | Производство: | DiaSys |
Метод: | |
Объем: | |
Кат. номер: | 137019910930 |
Цена (с НДС 10%): | по запросу | В корзину |
Наименование: Реагенты диагностические для биохимических исследований in vitro Бета-Гидроксибутират (В-Hydroxydutyrate FS), 100 мл. Примечание: |