Амилаза (Amylase Liquid, AML)

Amylase Liquid

Альфа-амилаза (Amylase Liquid)

Определение активности α-амилазы в сыворотке, плазме, моче согласно рекомендации IFCC мод.

КОЛИЧЕСТВО в наборе:     N по каталогу 17632                        250 мл

НАЗНАЧЕНИЕ

α-Амилаза фермент, катализирующий гидролиз крахмала до мальтозы. В организме человека α-амилаза содержится в различных органах и тканях и имеет соответствующее название. Определение активности α-амилазы - наиболее распространенный тест при диагностике панкреатита. Наряду с хроническим панкреа­титом и воспалительной фазой острого панкреатита высокое содержание фермента в крови наблюдается при почечной патологии, воспалении легких, паротите, травме головного мозга, при послеоперационных со­стояниях и макроамилазэмии. Для подтверждения диагноза панкреатита рекомендуется определение и других специфических ферментов, таких как липаза и панкреатическая α-амилаза.

МЕТОД

α-Амилаза катализирует гидролиз EPS-субстрата (Ethylidene Protected Substrate) p-нитрофенил-мальтогептаозид 4,6 этилиден-защищенный (этилиден - G₇PNP) с образованием 2 этилиден^₅ + 2 G₂PNP + 2 этилиден^₄ + 2 G₃PNP + этилиден^₃ + G₄PNP. Входящая в состав набора α-глюкозидаза гидролизует все фрагменты G2PNP, G3PNP и G4PNP до р-нитрофенола (PNP) и глюкозы (G). Образование PNP в про­цессе реакции приводит к росту оптической плотности во времени. Скорость накопления PNP прямо про­порциональна активности α-амилазы в пробе.

СОСТАВ НАБОРОВ

1 .  Реагент 1   4 х 50 мл

HEPES буфер (рН = 7,15)  52,5 ммоль/л

Хлорид магния  12,6 ммоль/л

Хлорид натрия  87 ммоль/л

α-Глюкозидаза  > 4 кЕ/л

Азид натрия < 0,1 %

2. Реагент 2. 1 х 50 мл

HEPES буфер (рН = 7,15)  52,5 ммоль/л

4,6-этилиден-G₇PNP  > 4 ммоль /л

Азид натрия < 0,1 %

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ

Реагенты готовы к применению.

В нераспечатанных флаконах реагенты стабильны вплоть до указанной даты при хранении 2...8°С. После вскрытия реагенты сохраняет стабильность в течение 90 дней при хранении 2...8°С. Стабильность реагентов обеспечивается при отсутствии загрязнения. Флаконы закрывайте крышками сразу после использования.

 ПРОБЫ

Сыворотка, плазма (гепарин, ЭДТА) или моча.

Активность α-амилазы в плазме и сыворотке сохраняется в течение 30 дней при хранении 2...8°С,

в моче - 10 дней при 2...8°С. В образцах мочи с рН < 5 активность фермента снижается.

Моча должна быть прозрачной и не содержать осадка. Осадок устраняется центрифугированием.

УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЯ

Длина волны 405 нм

Оптический путь 1 см

Температура 37°С

Измерение : кинетическое, реакция с увеличением оптической плотности

СХЕМА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до 37°С. Температура должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение всего определения.

Тщательно перемешать и запустить секундомер. Измерить оптическую плотность опытной пробы ровно че­рез 1 минуту. Повторить измерение 3 раза с интервалом 1 минуту.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

Вычислить среднее изменение оптической плотности за 1 минуту (АА/мин). Для расчета активности ос-амилазы в пробе полученное значение АА/мин умножьте на следующий фактор: Е/л (37°С)  = АА/мин х 3730

Пропорциональное изменение объемов реагентов и пробы не влияет на конечный результат.

ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ

Диапазон измерений 2 - 1500 Е/л. Если активность фермента превышает 1500 Е/л, добавьте к 0,1 мл ис­ходной пробы 0,9 мл физиологического раствора и повторите исследование. Полученный результат ум­ножьте на 1 0 (коэффициент разведения).

РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для проведения контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованными для этого метода значениями α-амилазы.

ПРИМЕЧАНИЯ

Пот и слюна содержат α-амилазу. Для предупреждения загрязнения проб не всасывайте жидкости в пи­петки ртом и избегайте контакта пробы, реагента и наконечника пипетки с кожей.

Раствор реагента содержит азид натрия в качестве консерванта. Избегать попадания реагента на кожу, слизистые оболочки и в рот!

Реагенты должны быть прозрачными, не используйте мутные реагенты. Слабое желтоватое окрашива­ние реагента 2 не влияет на пригодность реагента.

На результат теста не влияет присутствие в пробе гемоглобина в концентрации до 5,0 г/л, билирубина в концентрации до 684 мкмоль/л и триглицеридов в концентрации до 1 7,1 ммоль/л.

Информация для заказа

Область использования: Биохимические наборы	Производство:	Sentinel
	Метод:	кинетический
	Объем:	(фл х мл): R1 1х65, R2 1х18, S
	Кат. номер:	S/17632H
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: Амилаза (Amylase Liquid, AML) / Amylase Liquid. Примечание: