Амилаза панкреатическая (Pancreatic Amylase, pancreatic AML, P-type amylase)

Pancreatic Amylase

Определение активности α-амилазы в сыворотке, плазме, моче согласно рекомендации IFCC мод.

КОЛИЧЕСТВО в наборе:     N по каталогу 1 7631     1 00 мл

НАЗНАЧЕНИЕ

α-Амилаза фермент, катализирующий гидролиз крахмала до мальтозы. В организме человека α-амилаза содержится в различных органах и тканях и имеет соответствующее название. Панкреатическая α-амилаза вырабатывается исключительно клетками поджелудочной железы и выделяется в кишечный тракт. Слюн­ная α-амилаза синтезируется слюнными железами и кроме слюны содержится в слезах, поте и амниотиче-ской жидкости. Определение активности панкреатической α-амилазы используется при диагностике острого панкреатита и обострений хронического панкреатита.

МЕТОД

Определение активности α-амилазы состоит из двух последовательных стадий. На первой стадии в про­цессе инкубации в присутствии двух различных моноклональных антител ингибируется активность слюнной α-амилазы. На второй стадии панкреатическая α-амилаза катализирует гидролиз EPS-субстрата (Ethylidene Protected Substrate) p-нитрофенил-мальтогептаозид 4,6 этилиден-защищенный (этилиден - G₇PNP) с обра­зованием 2 этилиден^₅ + 2 G₂PNP + 2 этилиден^₄ + 2 G₃PNP + этилиден-G;! + G₄PNP. α-Глюкозидаза гид-ролизует все фрагменты G₂PNP, G₃PNP и G₄PNP до р-нитрофенола (PNP) и глюкозы (G). Образование PNP в процессе реакции приводит к росту оптической плотности во времени. Скорость накопления PNP прямо пропорциональна активности панкреатической α-амилазы в пробе.

СОСТАВ НАБОРА

1 . Реагент 1       4 х 20 мл

HEPES буфер (рН = 7,15) 52,5 ммоль/л

Хлорид магния 12,6 ммоль/л

Хлорид натрия 87 ммоль/л

α-Глюкозидаза 4 кЕ/л

Моноклональные антитела к слюнной α-амилазе 30 мг/л

Азид натрия < 0,1 %

2. Реагент 2      1 х 20 мл

HEPES буфер (рН = 7,15)  52,5 ммоль/л

4,6-этилиден-G₇PNP > 4 ммоль/л

Азид натрия < 0,1 % 

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ

Реагенты готовы к применению.

В нераспечатанных флаконах реагенты стабильны вплоть до указанной даты при хранении 2...8°С. После вскрытия реагенты сохраняют стабильность в течение 90 дней при хранении 2...8°С. Стабильность реагентов обеспечивается при отсутствии загрязнения. Флаконы закрывайте крышками сразу после использования.

ПРОБЫ

Сыворотка, плазма (гепарин, ЭДТА).

Активность панкреатической α-амилазы в плазме и сыворотке сохраняется в течение 30 дней при 2...8°С.

УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЯ

Длина волны 405 нм

Оптический путь 1 см

Температура: 37°С

Измерение: кинетическое, реакция с увеличением оптической плотности

СХЕМА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до 37°С. Температура должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение всего определения. 

Тщательно перемешать и запустить секундомер. Через 1 - 3 минуты измерить оптическую плотность опыт­ной пробы. Повторить измерение 3 раза с интервалом 1 минуту.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

Вычислить среднее изменение оптической плотности за 1 минуту (АА/мин). Для расчета активности пан­креатической α-амилазы в пробе полученное значение АА/мин умножьте на следующий фактор: Е/л (37°С)  = АА/мин х 3730

Пропорциональное изменение объемов реагентов и пробы не влияет на конечный результат.

ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ

Диапазон измерений 2 - 1500 Е/л. Если активность фермента превышает 1500 Е/л, добавьте к 0,1 мл ис­ходной пробы 0,9 мл физиологического раствора и повторите исследование. Полученный результат ум­ножьте на 1 0 (коэффициент разведения).

РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ

Сыворотка / плазма - от 8 до 53 Е/л

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для проведения контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованными для этого метода значениями панкреатической α-амилазы.

ПРИМЕЧАНИЯ

Пот и слюна содержат α-амилазу. Для предупреждения загрязнения проб не всасывайте жидкости в пи­петки ртом и избегайте контакта пробы, реагента и наконечника пипетки с кожей.

Раствор реагента содержит азид натрия в качестве консерванта. Избегать попадания реагента на кожу, слизистые оболочки и в рот!

Реагенты должны быть прозрачными, не используйте мутные реагенты. Слабое желтоватое окрашива­ние реагента 2 не влияет на пригодность реагента.

На результат теста не влияет присутствие в пробе гемоглобина в концентрации до 5,0 г/л, билирубина в концентрации до 684 мкмоль/л и триглицеридов в концентрации до 1 7,1 ммоль/л.

Информация для заказа

Область использования: Биохимические наборы	Производство:	Sentinel
	Метод:	кинетический
	Объем:	(фл х мл): R1 1х65; R2 1х18, S
	Кат. номер:	S/17631H
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: Амилаза панкреатическая (Pancreatic Amylase, pancreatic AML, P-type amylase) / Pancreatic Amylase. Примечание: