ГБДГ жидкий

Кинетическое определение активности α-гидроксибутиратдегидрогеназы (HBDH) в сыворотке и плазме со­гласно рекомендации DGKC.

КОЛИЧЕСТВО в наборе:     N по каталогу 1 7636                                      11 2 мл

НАЗНАЧЕНИЕ

HBDH является изоферментом лактатдегидрогеназы и содержится в миокарде. Возрастание активности HBDH в крови является чувствительным и специфическим признаком инфаркта миокарда.

МЕТОД

HBDH катализирует реакцию гидроксилирования α-кетобутирата с образованием α-гидроксибутирата с од­новременным окислением β-NАDН₂ до β-NАD. Скорость уменьшения оптической плотности при длине вол­ны 340 нм пропорциональна активности фермента в пробе. 

СОСТАВ НАБОРА

1. Реагент 1       2 х 50 мл

Трис буфер (рН = 7,5)                      0,05 моль/л

α-Кетобутират                                  0,03 моль/л

Азид натрия                                      < 0,1 %
2. Реагент 2       1 х 12 мл

Трис буфер (рН = 1 0,4)                   0,05 моль/л

р^АДН₂                                            2,68 ммоль/л

Азид натрия                                      < 0,1 %

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ

Реагенты готовы к применению.

В нераспечатанных флаконах реагенты стабильны вплоть до указанной даты при хранении 2...8°С.

После вскрытия реагенты сохраняет стабильность в течение 90 дней при хранении 2...8°С в защищенном от

света месте.

Стабильность реагентов и растворов обеспечивается при отсутствии загрязнения. Флаконы закрывайте крышками сразу после использования.

ПРОБЫ

Сыворотка, плазма (гепарин, ЭДТА) без гемолиза (в эритроцитах высокое содержание HBDH). Активность HBDH в сыворотке и плазме сохраняется в течение 3 дней при хранении 2...8°С

УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЯ

Длина волны 340 (365 - 334) нм

Оптический путь 1 см

Температура 37°С

Измерение: кинетическое, реакция с уменьшением оптической плотности

СХЕМА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до 37°С. Температура должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение всего определения.

Добавить в термостатированную кювету (мкл)  

Проба                                                                                    50

Реагент 1                                                                               1500

Тщательно перемешать, инкубировать 1 минуту при 37°С.

Реагент 2                                                                               150

Тщательно перемешать и запустить секундомер. Измерить оптическую плотность опытной пробы ровно че­рез 1 минуту. Повторить измерение 3 раза с интервалом 1 минуту.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

Вычислить среднее изменение оптической плотности за 1 минуту (АА/мин). Для расчета активности HBDH в пробе полученное значение АА/мин умножьте на следующий фактор: Е/л (37°С)  = АА/мин х 5400

Пропорциональное изменение объемов реагентов и пробы не влияет на конечный результат.

ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ

Диапазон измерений 3 - 500 Е/л. Если активность фермента превышает 500 Е/л, добавьте к 0,1 мл исход­ной пробы 0,9 мл физиологического раствора и повторите исследование. Полученный результат умножьте на 1 0 (коэффициент разведения).

РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ

72 - 1 82 Е/л

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для проведения контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованными для этого метода значениями HBDH.

ПРИМЕЧАНИЯ

1 .   Раствор реагента содержит азид натрия в качестве консерванта. Избегать попадания реагента на кожу, слизистые оболочки и в рот!

Реагенты должны быть прозрачными, не используйте мутные реагенты.

На результат теста не влияет присутствие в пробе билирубина в концентрации до 684 мкмоль/л, триг-лицеридов в концентрации до 17,1 ммоль/л и аскорбиновой кислоты в концентрации до 1,7 ммоль/л. Гемолизированные образцы не пригодны для проведения анализа вследствие высвобождения HBDH из эритроцитов.

Информация для заказа

Область использования: Биохимические наборы	Производство:	Sentinel
	Метод:
	Объем:	2x50;1x12
	Кат. номер:	17636
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: ГБДГ жидкий. Примечание: