Желчные кислоты 5x10;1x13 Sentinel, Италия

Желчные кислоты

Желчные кислоты ТВА

REF 17002В

Ферментативное колориметрическое определение активности общих желчных кислот в сыворотке крови.

реагент 1а: 5 х 10 (мл) – реагент 1b: (лиофилизованный) 5 х 10 (мл)

реагент 2: 1 х 13 (мл) – стандарт: 1 х 5 (мл).

IVD: медицинское устройство для диагностики in vitro.

Стандарт / калибратор: определение относится к стандарту / калибратору.

Реагент: определение относится к определенному реагенту.

Контроль: определение относится к контролю.

Меры безопасности при применении:

Помимо возможных рисков в отношении химически активных компонентов реактива, продукт может содержать такие неактивные компоненты, как консерванты (например, азид натрия или другие) и детергенты. Общая концентрация этих компонентов ниже пределов, указанных в ранее изданных Директивах 67/548/ЕЕС и 1999/45/ЕЕС и дополнениях и изменениях в отношении классификации, маркировки и упаковки опасных химических соединений (реагентов). Однако, рекомендуется осторожное обращение с продуктом, необходимо также избегать контактов с глазами, кожей и слизистой оболочкой, приема внутрь, и применять лабораторные реагенты в соответствии с правилами добросовестной лабораторной практики.

Резюме:

Общие желчные кислоты метаболизируются в печени и служат в качестве маркера функции печени. Рост уровня общих желчных кислот в сыворотке может оказаться симптомом острого гепатита, хронического гепатита, склероза печени и рака печени.

Принцип тестирования:

В присутствии NAD, фермент 3-альфа гидроксистероид дегидрогеназы (3-альфа HSD) преобразует желчные кислоты в 3-кето стероиды и NADН. Образующийся NADН реагирует с нитротетразолием синим (NВТ) с образованием формазанового красителя в присутствии фермента диафоразы. Интенсивность окрашивания формазанового красителя пропорциональна концентрации желчных кислот в анализируемом образце.

Реагенты:

Реагенты, при их хранении при температуре 2-8 ⁰С в закрытых флаконах, стабильны в течение срока годности, указанного на упаковке. Реагенты должны быть прозрачными, не использовать мутные реагенты.

Компоненты набора и начальная концентрация химически активных компонентов:

- Реагент 1а:

буферный раствор натрия фосфата 65 ммоль / л, рН = 7.0; EDTA 0.77 ммоль / л; натрия азид < 0.1 %.

- Реагент 1b: (лиофилизованный):

щавелевая кислота 45 ммоль / л; диафораза 250 Ед/л; NAD⁺ 2.0 ммоль / л, NВТ 0.25 ммоль / л, 3-оксо-5-бета стероид дельта ⁴-дегидрогеназа 0.4 кЕд/л.

- Реагент 2:

3-альфа HSD ≥ 500 Ед / л, натрия азид < 0.1 %.

- Стандарт:

стандарт желчных кислот, концентрация указана на этикетке флакона.

Штрих-код и номер флакона, если они напечатаны на этикетках реагентов, относятся к применению продукта на анализаторах Hitachi 911/912. Подробная информация о применении предоставляется по запросу.

Примечания и ограничения:

Информация о реагентах:

- величина Стандарта подтверждается использованием внутреннего стандарта, полученного из навески очищенного материала.

- Реагент 1а должен быть прозрачным, не использовать мутный реагент.

- Раствор R1 имеет типичное желтое окрашивание.

Приготовление растворов реагентов:

Раствор R1: растворить содержимое одного флакона Реагента 1b в содержимом одного флакона Реагента 1а. Дать отстояться в течение 10 минут и осторожно перемешать.

Стабильность: 7 дней при температуре 2-8 ⁰С или 4 недели при температуре -20 ⁰С после восстановления, если избегать контаминации и немедленно после использования закрывать флакон.

Реагент 2: готов к применению. Реагент, при его хранении при температуре 2-8 ⁰С в закрытых флаконах, стабилен в течение срока годности, указанного на упаковке. Стабильность: 90 дней при температуре 2-8 ⁰С после вскрытия, если избегать контаминации и немедленно после использования закрывать флакон.

Стандарт: готов к применению. Реагент, при его хранении при температуре 2-8 ⁰С в закрытых флаконах, стабилен в течение срока годности, указанного на упаковке. Стабильность: 120 дней при температуре 2-8 ⁰С после вскрытия, если избегать контаминации и немедленно после использования закрывать флакон.

Контроль качества:

Для подтверждения точности теста использовать следующие контрольные материалы для различных концентраций аналита:

Bile Acids Controls REF 16002А 2 х (2 x 3) (мл).

Лиофилизованный контрольный материал. Для применения следовать инструкциям к тест-набору.

Анализируемый образец:

Свежая сыворотка. Избегать применения гемолизованных или высоко липемических образцов. Забор образцов вести в соответствии с процедурой NCCLS, указанной в библиографии (1). Стабильность образца сыворотки: 5 дней при температуре 2-8 ⁰С.

Требуемые оборудование и материалы, не входящие в комплект поставки:

- обычное лабораторное оборудование.

- фильтры, фотометр или спектрофотометр.

Аналитическая процедура:

Длина волны: 546 нм (540 - 570 нм).

Длина ячейки: 1 см.

Температура: 37 ⁰С.

Анализируемый образец / Раствор R 1 / Реагент 2: 1 / 2 / 0.5.

Реакция: фиксированное время (рост).

Перед процедурой дать реагентам достичь рабочей температуры. Пропорциональное изменение объемов реагентов, указанных для аналитической процедуры, не влияет на результат.

Перенести в кювету:	Эталонный раствор	Анализируемый образец	Стандартный раствор	Стандарт
Анализируемый образец	0.2 мл	0.2 мл	-	-
Стандарт	-	-	0.2 мл	0.2 мл
Раствор R 1	0.4 мл	0.4 мл	0.4 мл	0.4 мл
Тщательно перемешать и инкубировать 5 минут при рабочей температуре. Добавить:
Реагент 2	-	0.1 мл	-	0.1 мл
Дистиллированная вода	0.1 мл	-	0.1 мл	-

Тщательно перемешать и инкубировать 5 минут при рабочей температуре. Сразу же провести считывание оптической плотности анализируемого образца (AS) и стандарта (AST) относительно определения оптической плотности эталонного раствора (ABS) и стандартного раствора (ABST).

Расчеты:

(AS - ABS) / (AST – ABST) x [STD] * = содержание желчных кислот в мкмоль на 1 л анализируемого образца.

* = концентрация желчных кислот в мкмоль, указанная на этикетке флакона со стандартом.

Референтные величины:

Сыворотка (натощак): 2 - 10 мкмоль /л;

Рекомендуется, чтобы в каждой лаборатории был установлен свой референтный диапазон.

Процедура анализа (определение на автоматическом анализаторе Hitachi):

Интерференция: на результат теста не влияет присутствие конъюгированного и не конъюгированного билирубина в концентрации до 20 мг/дл, гемоглобина в концентрации до 1 г/дл, и триглицеридов в концентрации до 250 мг/дл.

Измеряемый диапазон: 1.0 – 200 мкмоль /л. Образцы с концентрацией выше 200 мкмоль / л необходимо разбавить физиологическим раствором в отношении 1 : 10 и полученный результат умножить на коэффициент разведения (10).

Точность внутри определения:

определяется на 20 репликациях каждого контроля (тестируются два уровня – L1 / L2). Получены следующие результаты:

L1: среднее 6.59 мкмоль /л, SD 0.14, CV % 2.20; L2: среднее 73.58 мкмоль /л, SD 0.67, CV % 0.91.

Точность между определениями:

определяется в течение 10 дней на 2 повторностях каждого контроля (2 уровня – L1 / L2). Получены следующие результаты:

	Среднее, мкмоль /л	SD	CV %	SD	CV %	SD	CV %
	Среднее, мкмоль /л	Внутри серии испытаний		Между сериями испытаний		Повторяемость
L1	6.63	0.17	2.56	0.22	3.37	0.28	4.23
L2	74.40	1.35	1.82	1.39	1.87	1.94	2.61

Чувствительность: 1.0 мкмоль /л.. Чувствительность определяется на 10 повторностях физиологического раствора и обозначается как «среднее нулевое значение + 3SD».

Погрешность: Данный тест (y) сравнивался с коммерческим тестом (х). Получены следующие результаты:

N = 42, r = 0.985; y = 0.98 x + 0.89.

Утилизация отходов:

Утилизацию реагентов производят в соответствии с требованиями местных законодательных норм.

Библиография:

NCCLS. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard – Fifth Edition (H3-A5). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards, 2003.
Kaplan L. A., Pesce A. J. Clinical Chemistry, Mosby Ed., 1996.
EU-Dir 1999/11 Commission Directive of 8 March 1999 adapting to technical progress the principles of Good Laboratory Practice as specified in Council Directive 87/18/EEC.
Jacobs D. S., Kasten Jr. B. L., De Mott W. R., Wolfson W. L. Laboratory Text Handbook, Lexi-Comp and Williams &Wilkins, 2^nd Edition (1990).
Mashige F., Imai K., Osuga T., Clin. Chim. Acta, vol. 70: 79 – 86 (1976).
Osuga T., Mitamura K., Mashige F., Imai K. Clin. Chim. Acta, vol. 75: 81 – 90 (1977).

Информация для заказа

Область использования: Биохимические наборы	Производство:	Sentinel
	Метод:
	Объем:	5x10;1x13
	Кат. номер:	17002B
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: Желчные кислоты 5x10;1x13 Sentinel, Италия / Желчные кислоты. Примечание: