Лактат

Колориметрический тест для определения лактата в сыворотке, плазме и цереброспинальной жидкости. КОЛИЧЕСТВО в наборе:      N по каталогу 1 7285     50 мл

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

Лактат в основном образуется в скелетных мышцах в результате анаэробного превращения глюкозы в цик­ле Кори. Обычно лактат определяют вместе с пируватом для выявления молочного ацидоза, развивающе­гося в результате снижения оксигенации тканей или вследствие дефицита ферментов.

МЕТОД

Лактат окисляется лактатоксидазой до пирувата и перекиси водорода, которая в присутствии пероксидазы реагирует с TOOS ^-этил-^(2-гидрокси-3-сульфопропил)-3-метиланилин) с образованием окрашенного соединения. Интенсивность окрашивания пропорциональна концентрации лактата в пробе.

СОСТАВ НАБОРА

1. Реагент 1а     1 х 50 мл

 

2. Реагент 1в     5 фл. (лиоф)

буфер Гудса, рН = 7,0                           50 ммоль/л

TOOS                                                   > 0,3 ммол/л

Лактатоксидаза                                > 0,2 кЕ/л

Пероксидаза                                     > 1 кЕ /л
4-аминоантипирин                          0,1 ммол/л

Азид натрия                                        < 0,1 %

3. Стандарт       1 х 5 мл

Лактат (концентрация в стандарте (8-1 0 мг/дл) указывается на этикетке флакона).
Азид натрия                                         < 0,1 %

ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ

Раствор R1: добавьте 10 мл реагента 1а во флакон с лиофилизированным реагентом 1в. Осторожно пере­мешайте, оставьте на 1 0 мин до полного растворения. Раствор стабилен в течение 30 дней при хранении 2...8°С.

Стандарт готов к применению. В нераспечатанном флаконе реагент стабилен вплоть до указанной даты при хранении 2...8°С. После вскрытия реагент сохраняет стабильность в течение 120 дней при 2...8°С. Стабильность реагента и стандарта обеспечивается при отсутствии загрязнения. Флаконы закрывайте крышками сразу после использования.

ПРОБЫ

Сыворотка, плазма или цереброспинальная жидкость.

Кровь собирается в пробирки, содержащие ингибитор гликолиза.

Сыворотка. Кровь собирается в пробирки, содержащие монойодацетат натрия (конечная концентрация 5 мг/ 1 0 мл цельной крови). Стабильность 2 дня при 2...8°С.

Плазма. Кровь собирается в пробирки, содержащие фторид натрия (в концентрации 2,5 мг на 1 мл цельной крови) и оксалат калия (в концентрации 2 мг на 1 мл цельной крови). Центрифугировать пробы следует не позднее, чем через 1 5 мин после забора крови. Стабильность 2 дня при 2...8°С.

Важные замечания:

Концентрация лактата в крови быстро увеличивается при физических нагрузках, и, обычно, возвраща­ется к норме через 30 минут, однако, может иметь место индивидуальная вариабельность этого показате­ля.

Кровь берется натощак, в состоянии покоя. При взятии крови длительность веностаза не должна пре­вышать 30 секунд, использование жгута не рекомендуется.

В результате процессов внутриклеточного гликолиза, концентрация лактата в пробе может быстро уве­личиться. Поэтому, для получения правильных результатов, необходимо сразу выполнить отделение кле­точных элементов. Кровь должна храниться на льду, отделение плазмы должно быть выполнено в течение 15 мин после взятия крови.

Цереброспинальная жидкость. Для анализа используется свежесобранная цереброспинальная жид­кость. Пробы не обрабатываются. Стабильность - 1 день при температуре хранения 2.8°С или 1 месяц при -20 °С.

УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЯ

Длина волны                       : 550 (540-560) нм

Оптический путь                : 1 см

Температура                       : 37°С

Измерение                         : по конечной точке (увеличение оптической плотности)

СХЕМА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Перед проведением анализа реагенты следует прогреть до 37°С. Температура должна быть стабильной (+/- 0,5°С) в течение всего определения.

Добавить в кюветы (мкл)	Холостая проба	Калибровочная проба	Опытная проба
Дистиллированная вода	10	-	-
Стандарт	-	10	-
Проба	-	-	10
Раствор R1	1000	1000	1000

Тщательно перемешать, инкубировать 10 минут при 37°С, измерить оптическую плотность (А) про­бы/стандарта против холостой пробы. Окраска стабильна в течение 60 мин. Пропорциональное изменение объемов реагентов и пробы не влияет на конечный результат.

ВЫЧИСЛЕНИЕ

С = С станд   х  A пробы/ A станд. [ммоль/л ]

ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ

Диапазон измерений 0,1 - 16,7 ммоль/л. Если концентрация лактата в пробе превышает 16,7 ммоль/л, до­бавьте к 0,1 мл исходной пробы 0,9 мл физиологического раствора и повторите исследование. Полученный результат умножьте на 1 0 (коэффициент разведения).

РЕФЕРЕНТНЫЕ ПРЕДЕЛЫ

Сыворотка / плазма (венозная кровь)	0,5 - 2,2 ммоль/л
Цереброспинальная жидкость Новорожденные От 3 до 10 дней Более 10 дней Взрослые	1,1 - 6,7 ммоль/л 1,1 - 4,4 ммоль/л 1,1 - 2,8 ммоль/л 1,1 - 2,4 ммоль/л

Фактор пересчета единиц измерения: [лактат] мг/дл х 0,111 0 = [лактат] ммоль/л

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для проведения контроля качества рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованными для этого метода значениями лактата.

ПРИМЕЧАНИЯ

1 .   Реагенты должны быть прозрачными, не используйте мутные реагенты.

Слабое розовое окрашивание раствора R1 не влияет на пригодность реагента.

На результат теста не влияет присутствие в пробе билирубина в концентрации до 51 2 мкмоль/л и триг-лицеридов в концентрации до 1 7,1 ммоль/л.

 

Информация для заказа

Область использования: Биохимические наборы	Производство:	Sentinel
	Метод:	конечная точка
	Объем:	5x10
	Кат. номер:	S/17285
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: Лактат. Примечание: