Набор QIFIKIT для количественного определения антигенов на клеточной поверхности

DAKO QIFIKIT for Flow Cytometry

Набор QIFIKIT предназначен для количественного определения антигенов на клеточной поверхности методом проточной цитометрии с использованием непрямого иммунофлуоресцентного анализа.

Набор QIFIKIT состоит из 6 популяций микросфер диаметром ~10мкм, несущих на поверхности различные, четко определенные количества мышиных моноклональных антител (Mab). Число молекул Mab на 6 популяциях микросфер определено в диапазоне от 0 до 400000-800000. Точные значения указаны в инструкции к набору. Микросферы, имитирующие клетки, помечены специфическими первичными мышиными моноклональными антителами.

Краткое описание процедуры количественного определения.

Клетки образца метятся первичными мышиными Mab в достаточной концентрации. В этих условиях первичные Mab моновалентно связываются с антигенами на клеточной поверхности. Далее, число связанных молекул антител соответствует количеству сайтов антигенов.

Затем клетки инкубируются:

1. с микросферами QIFIKIT;
2. с поликлональными козьими анти-мышиными антителами к иммуноглобулинам, меченными FITC (Goat F(ab`)2, Кат.№ F0479) в достаточных концентрациях.

Калибровочная кривая строится как зависимость интенсивности флуоресценции определенной популяции микросфер от количества молекул Mab на микросферах. Количество антигенных сайтов на клетках образца определяется интерполяцией.

В состав набора входят также два «коктейля» микросфер: "Set-Up Cocktail" - микросферы для настройки и "Calibration Cocktail" -микросферы для калибровки, по 1 мл, этого количества достаточно для 10 калибровок. В набор входят также поликлональные козьи анти-мышиные антитела к иммуноглобулинам, меченные FITC (Goat F(ab`)2, Кат.№ F0479), 200 мл.

Набор экономичен в использовании, так как различные клетки образцов могут быть помечены различными первичными антителами, при этом количественное определение можно производить одним и тем же типом калибровочных микросфер.

Важный момент - образцы и микросферы должны инкубироваться с конъюгирующими агентами одновременно.

Литература:

1. Poncelet P, Carayon P. Cytofluorometric quantification of cell-surface antigens by indirect immunofluorescence using monoclonal antibodies. J Immunol Methods 1985;85:65-74.
2. Poncelet P, Lavabre-Bertrand T, Carayon P. Quantitative phenotypes of B chronic lymphocytic leukemia B cells established with monoclonal antibodies from the B cell protocol. In: Reinherz EL et al., eds. Leukocyte Typing II. New York-Berlin-Heidelberg-Tokyo: Springer-Verlag, 1986;2:329-43.

Информация для заказа

Область использования: Диагностические наборы для проточной цитометрии	Производство:	Dako
	Метод:	Проточная цитометрия
	Объем:	10 calibrations
	Кат. номер:	K007811
Цена (с НДС 10%):	по запросу	В корзину
Наименование: Набор QIFIKIT для количественного определения антигенов на клеточной поверхности / DAKO QIFIKIT for Flow Cytometry. Примечание: Готовые диагностические наборы для проточной цитометрии дополнительная информация (на английском языке).