Набор реактивов для нормализации кДНК Trimmer
Получение нормализованной кДНК, обогащенной полноразмерными последовательностями
- Простая и легковоспроизводимая процедура
- Повышение эффективности анализа транскриптома
|
Набор “Trimmer” предназначен для нормализации двухцепочечной кДНК, приготовленной с помощью наборов"Mint" (кат.# SK001) и "Mint-Universal" протокол-1 (кат.# SK002) и фланкированной одинаковыми последовательностями адаптеров.
После нормализации образцы кДНК имеют выравненные концентрации транскриптов, по разному представленных в исходном образце, и готовы для клонирования.
Нормализованная с помощью набора “Trimmer” кДНК может быть использована для псевдо-Нозерн блота, приготовления ненаправленно клонированных библиотек кДНК, обогащенных полноразмерными последовательностями, или для секвенирования на 454 секвенаторе.
|
КАТ.# | КОЛ-ВО | КОМПОНЕНТЫ НАБОРА | ИНСТРУКЦИЯ (PDF, англ.) |
Продукт предназначен для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукт не предназначен для лечения и диагностики заболеваний. |
NK001 |
На 10 р-ций |
4Х гибридизационный буфер, 70 мкл Лиофилизированная дуплекс-специфическая нуклеаза (ДСН), 50 ед. буфер для хранения ДСН, 70 мкл 2Х ДСН буфер, 250 мкл ДСН стоп-раствор, 500 мкл ПЦР праймер М1 (10 мкМ), 70 мкл ПЦР праймер М2 (10 мкМ), 90 мкл Контрольная ДНК (0.1 мкг/мкл), 20 мкл Плазмида содержащая фрагмент гена человеческого актина (0.1 мкг/мкл), 50 мкл Плазмида содержащая фрагмент гена человеческого убикуитина (0.1 мкг/мкл), 50 мкл |
|
Хранение: +4°С для лиофилизированной ДСН, -20°С для остальных компонентов
Транспортировка: комнатная температура
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки - 1 год.
Требования к исходному материалу: Набор "Trimmer" позволяет нормализовать образцы кДНК фланкированные одинаковыми последовательностями адаптеров и приготовленные с помощью следующих наборов реактивов для синтеза кДНК:
- Набор реактивов "Mint" (кат.# SK001)
- Набор реактивов "Mint-Universal", Протокол-1 (кат.# SK002)
- Набор реактивов "SMARTTM PCR cDNA synthesis kit" (Clontech кат.# 634902).
Для нормализации образцов, предназначенных для приготовления направленно-клонированных библиотек кДНК, используйте набор реактивов "Trimmer-Direct".
Метод нормализации
Для нормализации кДНК используется метод, основанный на уникальных свойствах дуплекс-специфической нуклеазы (ДСН) из гепатопанкреаса камчатского краба. ДСН термостабильна, эффективно расщепляет двухцепочечную ДНК и не активна по отношению к одноцепочечной ДНК. Метод позволяет нормализовать образцы кДНК, обогащенные полноразмерными последовательностями, без использования трудоемких и низкоэффективных стадий физического разделения.
| |
Результат нормализации кДНК из тканей человека.
(А) результат гель-электрофореза исходных (1) и нормализованных (2) образцов кДНК. (Б) Псевдо-Нозерн блот гибридизация этих образцов с [P32]-мечеными фрагментами генов глицеролфосфатдегидрогеназы (GPDH) и убикуитина С (UBC). M - 1-kb маркер длин ДНК (СибЭнзим); эм. - эмбриональный; тонк. киш. - тонкая кишка.
|
Информация для заказа
Область использования: | Производство: | Евроген |
Метод: | |
Объем: | 10 реакций |
Кат. номер: | NK001 |
Цена (с НДС 20%): | по запросу | В корзину |
Наименование: Набор реактивов для нормализации кДНК Trimmer. Примечание: набор реактивов |