Набор реактивов для нормализации кДНК Trimmer-direct
- Получение нормализованной кДНК, обогащенной полноразмерными последовательностями
- Простая и легковоспроизводимая процедура
- Повышение эффективности анализа транскриптома
|
Набор "Trimmer-Direct" предназначен для нормализации двухцепочечной кДНК, приготовленной с помощью набора "Mint-Universal" протокол-2 (кат.# SK002) и фланкированной разными последовательностями адаптеров.
После нормализации образцы кДНК имеют выравненные концентрации транскриптов, по разному представленных в исходном образце, и готовы для клонирования.
Нормализованная с помощью набора “Trimmer-Direct” кДНК может быть использована для приготовления направленно клонированных библиотек кДНК, обогащенных полноразмерными последовательностями, или для секвенирования на 454 секвенаторе.
|
КАТ.# | КОЛ-ВО | КОМПОНЕНТЫ НАБОРА | ИНСТРУКЦИЯ (PDF, англ.) |
Продукт предназначен для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукт не предназначен для лечения и диагностики заболеваний. |
NK002 |
На 10 р-ций |
4Х гибридизационный буфер, 70 мкл Лиофилизированная дуплекс-специфическая нуклеаза (ДСН), 50 ед. буфер для хранения ДСН, 70 мкл 2Х ДСН буфер, 250 мкл ДСН стоп-раствор, 500 мкл CDS-3M адаптер (10 мМ), 30 мкл ПЦР праймер М1 (10 мкМ), 70 мкл ПЦР праймер М2 (10 мкМ), 90 мкл Контрольная ДНК (0.1 мкг/мкл), 20 мкл Плазмида содержащая фрагмент гена человеческого актина (0.1 мкг/мкл), 50 мкл Плазмида содержащая фрагмент гена человеческого убикуитина (0.1 мкг/мкл), 50 мкл |
|
Хранение: +4°С для лиофилизированной ДСН, -20°С для остальных компонентов Транспортировка: комнатная температура Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки - 1 год.
Требования к исходному материалу: Набор "Trimmer-Direct" позволяет нормализовать образцы кДНК фланкированные специально подобранными последовательностями адаптеров и приготовленные с помощью следующих наборов реактивов для синтеза кДНК:
- Набор реактивов "Mint-Universal", Протокол-2 (кат.# SK002) - Набор "SMARTTM cDNA Library Construction kit" (Clontech кат.# 634901)* - Набор "CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction kit" (Clontech кат.# 634903)*.
* При синтезе кДНК с помощью наборов компании Clontech следуйте инструкции, приложенной к набору "Trimmer-Direct". При синтезе кДНК, пригодной для нормализации, необходимо использовать CDS-3M адаптер (входит в состав набора "Trimmer-Direct") вместо CDS-праймера, входящего в состав наборов фирмы Clontech.
Метод нормализации
Для нормализации кДНК используется метод, основанный на уникальных свойствах дуплекс-специфической нуклеазы (ДСН) из гепатопанкреаса камчатского краба. ДСН термостабильна, эффективно расщепляет двухцепочечную ДНК и не активна по отношению к одноцепочечной ДНК. Метод позволяет нормализовать образцы кДНК, обогащенные полноразмерными последовательностями, без использования трудоемких и низкоэффективных стадий физического разделения.
| |
Результат нормализации кДНК из тканей человека.
(А) результат гель-электрофореза исходных (1) и нормализованных (2) образцов кДНК. (Б) Псевдо-Нозерн блот гибридизация этих образцов с [P32]-мечеными фрагментами генов глицеролфосфатдегидрогеназы (GPDH) и убикуитина С (UBC). M - 1-kb маркер длин ДНК (СибЭнзим); эм. - эмбриональный; тонк. киш. - тонкая кишка.
|
Информация для заказаОбласть использования: | Производство: | Евроген | Метод: | | Объем: | 10 реакций | Кат. номер: | NK002 | Цена (с НДС 20%): | по запросу | В корзину | Наименование: Набор реактивов для нормализации кДНК Trimmer-direct. Примечание: набор реактивов |
|