Набор реактивов для ПЦР Tersus PCR kit
- Высокая точность синтеза ДНК
- Высокая специфичность ПЦР
- Эффективная амплификация сложных ДНК-матриц
 |
Полимераза Tersus представляет собой специально разработанную смесь термостабильных ДНК полимераз для высокоточной и специфичной амплификации фрагментов ДНК с широкого спектра матриц.
Область применения
- Амплификация фрагментов ДНК для переклонирования
- Сайт-направленный мутагенез
- Амплификации ДНК-фрагментов для дальнейшего секвенирования
- Высокоспецифичная ПЦР со сложных ДНК матриц
- ПЦР в реальном времени с интеркалирующими красителями (SYBR Green и др.) |
Tersus полимераза обладает следующими свойствами:
1. 5'>3' полимеразная активностью
2. Корректирующая 3'>5' экзонуклеазная активность
3. Высокая специфичность
4. Высокая точность синтеза ДНК
5. Быстрый горячий старт в первом цикле денатурации
6. Возможность клонирования продуктов ПЦР в ТА-векторы (например, pAL-TA вектор, кат.#TA001) за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков
Высокая точность синтеза ДНК является главным свойством Tersus полимеразы. При использовании Tersus полимеразы для переклонирования фрагментов ДНК удается существенно снизить затраты по дальнейшему секвенированию при отборе клонов, не содержащих точечных замен.
Высокая специфичность Tersus полимеразы позволяет использовать ее при работе со сложными матрицами, например, при амплификации высокогомологичных повторов, фрагментов геномной ДНК или кДНК.
Длина получаемых продуктов ПЦР зависит от свойств ДНК-матрицы (происхождения, GC-состава, структуры). При амплификации простых матриц (плазмидная ДНК, ДНК фага лямбда, предварительно амплифицированные фрагменты ДНК), Tersus полимераза позволяет получить фрагменты до 15 т.п.о., однако наилучшие результаты достигаются при амплификации фрагментов до 2-2,5 т.п.о. Для амплификации более длинных фрагментов необходима дополнительная оптимизация условий ПЦР.
Смесь Tersus поставляется вместе со специально подобранным 10 Х буфером, который обеспечивает оптимальную работу входящих в ее состав ферментов. Набор "Tersus PCR kit" также содержит смесь dNTP, стерильную воду, ДНК и праймеры для постановки контрольной реакции.
| ПРОДУКТ | КАТ.# | КОЛ-ВО | КОМПОНЕНТЫ НАБОРА | ИНСТРУКЦИЯ (PDF) |
Продукт предназначен для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукт не предназначен для лечения и диагностики заболеваний.
|
| НаборTersus PCR kit |
PK021 |
200 р-цийобъемом 25 мкл |
50X смесь полимераз Tersus, 100 мкл
10X Tersus буфер, 600 мкл
Смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (10 мМ каждого), 120 мкл
Контрольная ДНК матрица, 10 мкл
Смесь праймеров для контрольной ПЦР (5 мкМ каждого), 10 мкл
Вода, свободная от РНКаз, 4,5 мл
|
 |
| Tersus полимераза |
PK023 |
200 р-цийобъемом 25 мкл |
50X смесь полимераз Tersus, 100 мкл
10X Tersus буфер, 600 мкл |
|
Хранение: -20°С
Транспортировка: -70°С или -20°С
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки - 1 год.
 |
Сравнение эффективности амплификации сложных матриц с использованием различных полимераз на примере фрагмента L1Hs повтора.
(А) Амплификацию фрагмента L1Hs повтора (230 п.н.) проводили с 5 нг геномной ДНК человека за 28 циклов ПЦР: дорожка 1 – Taq-полимераза; 2 – Encyclo полимераза; 3 – Tersus полимераза; М – 1 kb ДНК маркер (СибЭнзим).
|
 |
Использование Tersus полимеразы для амплификации фрагментов ДНК фага λ различной длины.
Амплификацию фрагментов ДНК фага λ проводили с 25 нг ДНК-матрицы за 15 (дорожки 1, 2) и 19 (дорожки 3-5) циклов ПЦР: 1 – фрагмент 3 т.п.о.; 2 – фрагмент 5 т.п.о.; 3 – фрагмент 8 т.п.о.; 4 – фрагмент 10 т.п.о.; 5 – фрагмент 15 т.п.о.; М – 1 kb ДНК маркер (СибЭнзим).
|
Не рекомендуется использование Tersus полимеразы для:
1. Taq-Man ПЦР в реальном времени из-за отсутствия 5'>3'экзонуклеазной активности;
2. SNP-детекции с помощью аллель-специфичной ПЦР из-за наличия 3'>5' экзонуклеазной (proofreading) активности.
- Для задач, предъявляющих повышенные требования к размеру амплифицированного продукта (например, для амплификации образцов кДНК), рекомендуется использовать Encyclo полимеразу (кат.# PK001; PK002).
- Для анализа точечных замен (SNP) с помощью аллель-специфичной ПЦР рекомендуется SNPdetect полимераза (кат.# PK022).
- Для амплификации с использованием цельной крови в качестве матрицы рекомендуется InBlood полимераза (кат.# PK031; PK032).
Информация для заказа
| Область использования: | Производство: | Евроген |
| Метод: | |
| Объем: | 100 р-ций по 50 мкл |
| Кат. номер: | PK021 |
| Цена (с НДС 20%): | по запросу | В корзину  |
Наименование: Набор реактивов для ПЦР Tersus PCR kit.
Примечание: набор реактивов |
