Системы GasPak EZ Gas Generating Pouch Systems (системы газогенерирующих мешков GasPak EZ скачать pdf) представляют собой системы одноразового использования, позволяющие создавать атмосферу для поддержания первичного выделения и культивирования анаэробных, микроаэрофильных или капнофильных бактерий путем использования газогенерирующих пакетов внутри герметизируемых мешков одноразового использования.

КРАТКИЙ ОБЗОР И ОПИСАНИЕ

В 1965 г. Брюер (Brewer) и Алгайер (Allgeier) разработали одноразовый конверт для генерации водорода, который позже был модифицирован с добавлением возможности генерации диоксида углерода и снабжен внутренним катализатором1,2. Системы GasPak EZ Gas Generating Pouch Systems обеспечивают необходимые биологические условия и надежность без необходимости использования катализатора или активации. Пакеты GasPak EZ Gas Generating Sachets содержат все компоненты, необходимые для создания специальной атмосферы для инкубации образцов. Пакет и образцы помещают в герметизируемый мешок GasPak EZ. Мешок герметизируют и инкубируют.

ПРИНЦИПЫ МЕТОДИКИ

Пакет GasPak EZ Gas Generating Sachet представляет собой пакет с реагентами, который содержит неорганический карбонат, активированный уголь, аскорбиновую кислоту и воду. При извлечении пакета из наружной оболочки он активируется под действием воздуха. Активированный пакет с реагентами и образцы помещают в герметизируемый мешок (анаэростат) и герметизируют. Пакет быстро снижает содержание кислорода внутри мешка. Одновременно из неорганического карбоната образуется диоксид углерода.

• Для культивирования анаэробных бактерий пакеты с индикатором GasPak EZ Anaerobe Pouch System with Indicator Sachets создают анаэробную атмосферу в течение 2,5 часов; содержание диоксида углерода 10 % или более достигается в течение 24 часов. 
• Для культивирования микроаэрофильных бактерий пакеты GasPak EZ Campy Pouch System Sachets создают атмосферу с содержанием около 5 – 15 % кислорода. 
• Для культивирования микроорганизмов, требующих наличия диоксида углерода, пакеты GasPak EZ CO2 Pouch System Sachets создают атмосферу с содержанием диоксида углерода 3 % или более.

РЕАГЕНТЫ

Предупреждения и меры предосторожности

Для диагностики in vitro.

При выполнении любых процедур соблюдайте установленные меры биологической защиты. Контейнеры из-под образцов и другие загрязненные материалы стерилизуйте в автоклаве перед утилизацией. После использования пакет может быть теплым. Утилизируйте пакет после завершения реакции (после охлаждения). После использования поместите мешок в надлежащий сборник отходов. Не использовать повторно. НЕ используйте пакет, если наружная пленка повреждена или вскрыта. Избегайте воздействия прямого солнечного света и повышенных температур. НЕ открывайте герметизируемый мешок до окончания инкубации.

Пакеты GasPak EZ Pouch System Sachets предназначены для использования в герметизируемых мешках GasPak EZ. Использование пакетов в других системах может привести к недостоверным результатам.
Герметизируемые мешки GasPak EZ предназначены для использования с пакетами GasPak EZ Pouch System Sachets. Не используйте эти мешки с другими конвертами для генерирования газа (например, с конвертами BBL GasPak/GasPak Plus Envelopes).

Условия хранения. После получения храните пакеты при температуре 2 – 25 °C в сухом помещении.
Пакеты GasPak EZ Pouch System Sachets готовы к использованию. Дата окончания срока годности указана для закрытых неповрежденных пакетов при соблюдении условий хранения. Открывайте непосредственно перед использованием.

Индикатор GasPak EZ Dry Anaerobic Indicator должен иметь белый цвет перед использованием. Не используйте индикатор, если перед использованием он имеет синий цвет. Не прикасайтесь к таблетке индикатора и не открывайте упаковку индикатора для извлечения таблетки.

Разложение продукта. Не используйте пакеты с реагентами, если наружная упаковка повреждена или вскрыта. Не используйте герметизируемые мешки с разрывами или другими повреждениями. Активные компоненты. Аскорбиновая кислота, активированный уголь и вода. Предупреждение. Активированный уголь вызывает раздражение глаз, дыхательной системы и кожи.

МЕТОДИКА

Поставляемые материалы. GasPak EZ Gas Generating Pouch System. Для каждой системы необходимо использование герметизируемого мешка и пакета (см. раздел «Наличие»). Необходимые, но не поставляемые материалы. Дополнительные питательные среды, реагенты, культуры микроорганизмов для контроля качества и лабораторное оборудование, необходимое для выполнения методики.

Методика тестирования

1. Поместите засеянные чашки внутрь герметизируемого мешка. В системе GasPak EZ Campy Pouch System необходимо использовать по крайней мере 2 чашки Петри; система вмещает до 4 чашек Петри. Системы GasPak EZ CO2 Pouch System и GasPak EZ Anaerobe Pouch System with Indicator можно использовать с 1 – 4 чашками Петри. Примечание. Для оптимального роста в системе GasPak EZ Campy Pouch System поместите в мешок бумажную салфетку или ватный шарик, смоченный 5 мл воды.
2. В каждом герметизируемом мешке используется один пакет GasPak EZ Pouch System Sachet. Извлеките пакет GasPak EZ Pouch System Sachet из коробки. Снимите наружную пленочную упаковку.
3. Поместите активированный пакет в герметизируемый мешок GasPak EZ с чашками. Пакет следует разместить между чашками и мешком. При использовании системы GasPak EZ Anaerobe Pouch System with Indicator нет необходимости использовать отдельный анаэробный индикатор.
4. Закройте мешок, сжимая застежку.
5. Инкубируйте систему GasPak EZ Pouch System при температуре, необходимой для роста культивируемых микроорганизмов, но не выше 45 °C.
6. После инкубирования откройте мешок, извлеките чашки и утилизируйте пакет GasPak EZ Pouch System Sachet, индикатор и мешок надлежащим образом.

Контроль качества

Каждую систему GasPak EZ Gas Generating Pouch System необходимо периодически проверять на способность обеспечивать требуемые условия для роста соответствующих бактерий.
Система Микроорганизм для контроля качества
GasPak EZ Anaerobe Pouch System with Indicator Bacteroides fragilis ATCC 25285
GasPak EZ Campy Pouch System Campylobacter jejuni ATCC 29428
GasPak EZ CO2 Pouch System Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424
Следуйте требованиям контроля качества в соответствии с применимым местным, региональным и (или) федеральным законодательством, требованиями аккредитации и методиками контроля качества, принятыми в лаборатории. Для получения информации о надлежащих методиках контроля качества пользователям рекомендуется ознакомиться с документацией Института клинических и лабораторных стандартов США (CLSI, ранее NCCLS) и положениями Закона о совершенствовании работы клинических лабораторий (CLIA).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Анаэробные условия быстро достигаются в течение 2,5 часов; содержание диоксида углерода 10 % или более достигается в течение 24 часов при 35 °C. Образование конденсата должно наблюдаться в течение 30 минут после активации. Чашки с кровяным агаром приобретают восстановленный вид в течение 2 – 4 часов при температуре 35 °C. Анаэробный индикатор должен выглядеть восстановленным (иметь белый цвет) в течение 2 – 4 часов при температуре 35 °C.
Микроаэрофильные условия достигаются быстро с содержанием кислорода 5 – 15 % при температуре 35 °C.
Условия атмосферы, обогащенной диоксидом углерода, достигаются быстро с содержанием диоксида углерода более 3 % при температуре 35 °C.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ

GasPak EZ Anaerobe Pouch System with Indicator

Перед выпуском репрезентативные образцы каждой партии систем GasPak EZ Anaerobe Pouch System with Indicator проходят тестирование на эффективность.
Каждый образец пакета системы GasPak EZ Anaerobe Pouch System with Indicator помещают в герметизируемый инкубационный мешок с 4 чашками Петри, заполненными питательной средой. Пакет активируют и мешок герметизируют в соответствии с указаниями на этикетке и инкубируют при температуре 35 ± 2 °C. Примерно через 2,5 часа в инкубационный мешок вводят иглу калибра 22 длиной 38 мм и отбирают образец газа, помещают его в газовый хроматограф и определяют содержание кислорода в инкубационном мешке. Процентное содержание кислорода в каждом мешке должно составлять 1 % или менее, а среднее значение для всех образцов, прошедших тестирование на содержание кислорода, должно быть менее 0,7 %. Примерно через 24 часа инкубации при температуре 35 ± 2 °C отбирают еще один образец из мешка и определяют содержание диоксида углерода. Процентное содержание диоксида углерода в каждом мешке должно составлять 10 % или более. Все анаэробные сухие индикаторы должны быть восстановлены.

GasPak EZ Campy Pouch System

Перед выпуском репрезентативные образцы каждой партии систем GasPak EZ Campy Pouch System проходят тестирование на эффективность.
Каждый образец пакета системы GasPak EZ Campy Pouch System помещают в герметизируемый инкубационный мешок с 2 чашками Петри, заполненными питательной средой. Пакет активируют и мешок герметизируют в соответствии с указаниями на этикетке и инкубируют при температуре 35 ± 2 °C. Примерно через 24 часа в инкубационный мешок вводят иглу калибра 22 длиной 38 мм и отбирают образец газа, помещают его в газовый хроматограф и определяют содержание кислорода в инкубационном мешке. Процентное содержание кислорода в каждом мешке должно составлять от 5 до 15 %.

GasPak EZ CO2 Pouch System

Перед выпуском репрезентативные образцы каждой партии систем GasPak EZ CO2 Pouch System проходят тестирование на эффективность.

Каждый образец пакета системы GasPak EZ CO2 Pouch System помещают в герметизируемый инкубационный мешок с 2 чашками Петри, заполненными питательной средой. Пакет активируют и мешок герметизируют в соответствии с указаниями на этикетке и инкубируют при температуре 35 ± 2 °C. Примерно через 24 часа в инкубационный мешок вводят иглу калибра 22 длиной 38 мм и отбирают образец газа, помещают его в газовый хроматограф и определяют содержание диоксида углерода в инкубационном мешке. Процентное содержание диоксида углерода в каждом мешке должно составлять более 3 %.