Агар с желчью, глюкозой и фиолетовым красным (Violet Red Bile Agar w/ Glucose (VRBG) ISO 21528 (Eur. Pharm.))
Агар с желчью, глюкозой и фиолетовым красным, содержащий желчь, фиолетовый и красный красители, основан на Среде МакКонки (кат. № 1052) для обнаружения и подсчета желчетолерантных грамотрицательных энтеробактерий в молочных и других пищевых продуктах. В этой среде вместо лактозы в качестве углевода выступает глюкоза, и среда преимущественно используется в анализах гигиены сырого материала, обработанных пищевых продуктов и растений.
Группа энтеробактерий включает ферментирующие лактозу колиформные бактерии, а также Salmonella spp. и Shigella spp., не ферментирующие лактозу.
Панкреатический гидролизат желатина и дрожжевой экстракт являются источниками питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Глюкоза – ферментируемый углевод, источник углерода и энергии. Организмы, ферментирующие глюкозу, формируют красные колонии в присутствии индикатора рН – нейтрального красного. Соли желчных кислот кристаллический фиолетовый ингибируют грамположительные микроорганизмы. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.
Для тестировании гигиенического состояния сырых овощей больше подходит среда Агар с желчью, лактозой и фиолетовым красным (кат. № 1093), поскольку среди природной микрофлоры доминируют организмы, не ферментирующие лактозу, но утилизирующие глюкозу, как например, Pseudomonas spp., которые могут легко перерасти индикатор на агаре с желчью, глюкозой и фиолетовым красным.
Европейская Фармакопея 7.0 рекомендует следующее тестирование продуктов на наличие толерантных к желчи грамотрицательных бактерий. 1 г соответствующего продукта инокулировать в Бульон Мосселя (кат. № 1202) и инкубировать при 30–35°C в течение 24–48 часов. После этого пересеять на чашки с Агаром с желчью, глюкозой и фиолетовым красным. Инкубировать при 30–35°C 18–24 часа. Исследуемый продукт не содержит указанных микроорганизмов в случае отсутствия роста колоний.
ISO 21528 также рекомендует использовать эту среду в качестве селективной. При этом в случае, если подсчет энтеробактерий ведется для анализа гигиенической чистоты продукта, инкубирование должно производиться при 37°C. При 30°C инкубировать в случае преследования технологических целей и присутствия психротрофных энтеробактерий.
Удобно использовать метод разливания на чашки, при котором в стерильную чашку Петри вносится 1 мл нужного разведения, добавляется 15 мл среды, охлажденной до 45–50°C, и после осторожного вращения оставляется затвердевать. Сразу после затвердевания налить второй слой среды толщиной 5 мм. Дать затвердеть. Инкубировать 18–24 часа при температуре 35±2°C.
Метод глубинного посева подавляет рост грамотрицательных неферментирующих бактерий благодаря созданию анаэробных условий. Таким образом, стимулируется ферментация глюкозы, что приводит к образованию четко различимых фиолетово-красных колоний, окруженных зоной такого же цвета. Отметим, что колиформы будут ферментировать глюкозу и образовывать кислоту с выделением или без выделения газа. На этой среде также растут Klebsiella spp. и Citrobacter spp., которые более термоустойчивы, чем колиформы, и могут указывать на дефект производственного процесса (недостаточная термообработка продуктов).
Микробиологический тест
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 30–35°C и наблюдались через 18–24 часа (в соответствии с Европейской Фармакопеей 7.0).
Микроорганизмы
|
Рост
|
Цвет колоний
|
Escherichia coli ATCC 11775*
|
Хороший
|
Красный
|
Escherichia coli ATCC8739*
|
Хороший
|
Красный
|
Salmonella gallinarum NCTC 9240*
|
Хороший
|
Красный
|
Staphylococcus aureus ATCC 6538
|
Ингибируется
|
–
|
Shigella flexneri ATCC 29903*
|
Хороший
|
Красный
|
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
|
Хороший
|
–
|
Enterococcus faecalis ATCC 29122
|
Ингибируется
|
–
|
*Согласно ISO 21528 инкубировать при 37°C 24±2 часа.
|
Информация для заказа
Область использования: | Производство: | Conda |
Метод: | |
Объем: | 500 гр |
Кат. номер: | 1092 |
Цена (с НДС 10%): | по запросу | В корзину |
Наименование: Агар с желчью, глюкозой и фиолетовым красным (Violet Red Bile Agar w/ Glucose (VRBG) ISO 21528 (Eur. Pharm.)). Примечание: РУ ФСЗ 2009-04466 Расход среды (гр/л) 41.5 |