Блоттинг
Оборудование и реагенты для блоттинга
 Перенос белков и нуклеиновых кислот на поверхность иммобилизованных мембран
- Перенос белков
- Перенос нуклеиновых кислот
- Концентрирование/иммобилизация образцов
Блоттинг – это стандартный метод для переноса молекул на поверхность мембраны. Кроме того, блоттинг – это промежуточный этап в процедурах секвенирования белков и элюции белков и нуклеиновых кислот для последующего анализа.
Tank-блоттинг
Электро-блоттинг - важный метод переноса, главным образом, белков из полиакриламидных гелей на нитроцеллюлозные (или другие) мембраны. Tank-блоттинг происходит в вертикальных резервуарах, содержащих буферные растворы. На резервуары с двух сторон установлены платиновые электроды. При этой методике гель и мембрана зажаты в рамке между листами фильтровальной бумаги и пористыми пластинами. Обычно перенос происходит в течение 10-12 часов.
Полусухой блоттинг
Полусухой блоттинг проводится между двумя горизонтальными пластинами - электродами и позволяет провести перенос быстро и равномерно. В отличие от tank-блоттинга, при полусухом переносе используется небольшое количество буферного раствора, и процесс переноса происходит очень быстро, в течение нескольких минут. Кроме того, полусухой блоттинг может использоваться, для мягкого переноса белков с небольшим молекулярным весом и/или для эффективного переноса многокомпонентных смесей белков с широкой дисперсией молекулярных весов.
Инкубация и блокирование
После переноса белков на мембрану они могут быть визуализированы путем иммунодетекции. Иммунодетекция включает идентификацию белка через его реакцию со специфичным антителом. Для осуществления иммунодетекции белки инкубируют с первичными антителами, специфиными к данному белку, а затем со вторичными антителами, специфичными к первичным и конъюгированными с пероксидазой хрена.
Система автоматического блоттинга WIX-autoPP позволяет автоматизировать этот процесс.
Реагенты для Вестерн-блоттинга
На всех этапах, от разделения белков в геле до детекции требуется большое количество разнообразных реагентов: от компонентов буфера и геля до мембран и антител.
Himedia предоставляет большой выбор реагентов и материалов для проведения Вестер-блоттинга и электрофореза белков: красители, мембраны, казеин, буферы для нанесения, необходимые реагенты для приготовления буферов и гелей.
TransGen Biotech предоставляет готовые гели, окрашенные и неокрашенные маркеры молекулярной массы и хромогенные субстраты.
Fine Biotech является производителем высококачественных первичных и вторичных антител для выполнения Вестерн-блоттинга.
| 
