Набор для связывания антител с микросферами
Набор xMAP Antibody Coupling содержит все необходимые компоненты для самостоятельного проведения реакции связывания антител с микросферами MagPlex за три часа.
Реакция связывания
Связывание антитела с микросферой протекает в две стадии: карбоксильные группы на поверхности полистироловой микросферы должны быть активированы EDC (1-этил-3-[3-диметиламинопропил] карбодиимид гидрохлоридом). В результате образуется активный интермедиат - эфир ацилизомочевины. После добавления сульфо-N-гидроксисульфосукцинимида образуется более стабильный эфир, который реагирует с аминогруппами антител с образованием ковалентных связей.
Набор предназначен для однократного использования и содержит реагенты для связывания микросфер в количестве от 2.5х106 до 50х106. Пользователь может провести 10 отдельных реакций связывания с микросферами в количестве 2.5х106 или 4 реакции с микросферами в количестве 12.5х106.
Набор идеально подходит для:
- оптимизации протокола связывания (возможность провести до 10 отдельных реакций связывания);
- производителей наборов (возможность связывания 50 000 000 микросфер за одну реакцию).
С помощью набора можно присоедниять к микросферам не только антитела, но и другие белки. Белки не должны содержать примесей азида натрия, BSA, глицина, ТРИС, глицерола. Белки следует растворять в PBS рН 7.4
Рекомендации Luminex
- при проведении первой реакции связывания используйте 2-5 мг антител на 1х106 микросфер;
- храните компоненты набора при 2-8°С; не замораживайте!
- EDC следует хранить при -20°С;
- после связывания микросферы с антителами стабильны в течение 18 месяцев;
- не следует использовать реагент EDC вторично;
- в каждой реакции связывания следует использовать не менее 2.5х106 микросфер
Состав набора
компонент набора |
каталожный номер |
объем/масса |
количество |
EDC |
11-40144 |
10 мг |
1 |
Sulfo-NHS |
11-25169 |
250 мкл |
1 |
буфер для активации |
11-25171 |
45 мл |
1 |
буфер для промывки |
11-25167 |
30 мл |
1 |
пробирки 1.5 мл |
11-00277 |
- |
10 |
одноразовые дозаторы |
11-00321 |
- |
20 |
Скачать Руководство пользователя набора xMAP Antibody Coupling (на английском языке).
Скачать Информационный лист набора xMAP Antibody Coupling (на английском языке). Информация для заказа
|