Генетически-кодируемый фотосенсибилизатор KillerRed
- Генетически-кодируемый фотосенсибилизатор
- Активация зеленым светом
Описание белка
|
Фотосенсибилизаторы - вещества, способные производить активные формы кислорода (АФК) при облучением светом. Они могут быть использованы для селективной инактивации белков (технология CALI, chromophore-assisted light inactivation) или избирательного светоиндуцируемого уничтожения клеток при фотодинамической терапии.
KillerRed - единственный известный сегодня генетически кодируемый фотосенсибилизатор, который может быть непосредственно экспрессирован в клетках-мишенях (Bulina et al., 2006a; 2006b). Несмотря на склонность к димеризации, KillerRed может быть сшит с сигналами внутриклеточной локализации для его направления в выбранную внутриклеточную структуру или с белками-мишенями.
|
KillerRed - флуоресцентный белок, обладающий красной флуоресценцией (максимумы возбуждения и эмиссии при 585 и 610 нм, соответственно). Он не проявляет токсических свойств до активации зеленым светом. После облучения светом с длиной волны 540-580 нм, KillerRed утрачивает способность к флуоресценции и образует АФК, которые повреждают близлежащие молекулы.
Список продуктов
| НАЗВАНИЕ | КАТ.# | ОПИСАНИЕ | КОЛ-ВО | ТЕХНИЧЕСКАЯ ИНФОРМАЦИЯ |
| Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом, и защищены патентами и патентными заявками компании Евроген. |
| pKillerRed-C вектор |
FP961 |
Вектор для экспрессии KillerRed в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора, содержит полилинкер (MCS) на 3'- конце кодирующей последовательности KillerRed |
20 мкг |
 Описание (pdf, англ.)
Сиквенс (txt)
Карта рестрикции (pdf)
Таблица рестрикции (pdf)
|
| pKillerRed-N вектор |
FP962 |
Вектор для экспрессии KillerRed в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора, содержит полилинкер (MCS) на 5'- конце кодирующей последовательности KillerRed |
20 мкг |
Описание (pdf, англ.)
Сиквенс (txt)
Карта рестрикции (pdf)
Таблица рестрикции (pdf)
|
| pKillerRed-B вектор |
FP963 |
Вектор для экспрессии KillerRed в клетках прокариот |
20 мкг |
Описание (pdf, англ.)
Сиквенс (txt)
Карта рестрикции (pdf)
Таблица рестрикции (pdf)
|
| pKillerRed-dMito вектор |
FP964 |
Вектор для экспрессии KillerRed, слитого с сигналом локализации в митохондриях, в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора. Активация KillerRed, локализованного в митохондриях, приводит к гибели клеток путем апоптоза |
20 мкг |
Описание (pdf, англ.)
Сиквенс (txt)
Карта рестрикции (pdf)
Таблица рестрикции (pdf)
|
| pKillerRed-mem вектор |
FP966 |
Вектор для экспрессии KillerRed, слитого с сигналом локализации на мембране, в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора. Активация KillerRed, локализованного на мембране, приводит к гибели клеток в следствие разрушения липидного слоя. |
20 мкг |
Описание (pdf, англ.)
Сиквенс (txt)
Карта рестрикции (pdf)
Таблица рестрикции (pdf)
|
| Набор векторов "Cell-Killer vector set" |
FPK01 |
Набор включает pKillerRed-dMito вектор и pTurboGFP-N вектор |
20 мкг каждый вектор |
- |
| Набор векторов "Membrane-Killer vector set" |
FPK02 |
Набор включает pKillerRed-mem вектор и pTurboGFP-N вектор |
20 мкг каждый вектор |
- |
| Набор векторов "Double-Killer vector set" |
FPK03 |
Набор включает pKillerRed-dMito и pKillerRed-mem векторы, а также pTurboGFP-N вектор |
20 мкг каждый вектор |
- |
| АнтителаAnti-KillerRed |
AB961 |
Поликлональные антитела кролика к белкам KillerRed и JRed |
100 мкг |
Описание (pdf, англ.) |
| AB962 |
200 мкг |
Таблица основных свойств
Нормализованные спектры возбуждения (тонкая линия) и испускания (толстая линия) флуоресценции.
|
| ХАРАКТЕРИСТИКИ | |
*Яркость, произведение коэффициента молярной экстинкции и квантового выхода флуоресценции, деленное на 1000.
|
| Молекулярная масса, кДа |
27 |
| Длина полипептидной цепи, аминокислот |
239 |
| Структура |
димер |
| Агрегация в клетках |
нет |
| Скорость созревания при 37°C |
низкая |
| Активирующий свет |
green (e.g. 540-580 нм) |
| Цвет флуоресценции |
красный |
| Максимум возбуждения, нм |
585 |
| Максимум эмиссии, нм |
610 |
| Квантовый выход |
0.25 |
| коэффициент молярной экстинкции, M-1см-1 |
45 000 |
| Яркость* |
11.3 |
|
Список литературы
- Pletnev S, Gurskaya NG, Pletneva NV, Lukyanov KA, Chudakov DM, Martynov VI, Popov VO, Kovalchuk MV, Wlodawer A, Dauter Z, Pletnev V.
Structural basis for phototoxicity of the genetically encoded photosensitizer KillerRed.
J Biol Chem. 2009 Nov 13;284(46):32028-39
pmid: 19737938
- Butler MC, Itotia PN, Sullivan JM.
A High Throughput Biophotonics Instrument to Screen for Novel Ocular Photosensitizing Therapeutic Agents.
Invest Ophthalmol Vis Sci. 2009 Oct 15;[Epub ahead of print]
pmid: 19834043
- Carpentier P, Violot S, Blanchoin L, Bourgeois D.
Structural basis for the phototoxicity of the fluorescent protein KillerRed.
FEBS Lett. 2009 Sep 3;583(17):2839-42
pmid: 19646983
- Serebrovskaya EO, Edelweiss EF, Stremovskiy OA, Lukyanov KA, Chudakov DM, Deyev SM.
Targeting cancer cells by using an antireceptor antibody-photosensitizer fusion protein.
Proc Natl Acad Sci U S A. 2009 Jun 9;106(23):9221-5
pmid: 19458251
- Samarkina ON, Popova AG, Gvozdik EY, Chkalina AV, Zvyagin IV, Rylova YV, Rudenko NV, Lusta KA, Kelmanson IV, Gorokhovatsky AY, Vinokurov LM.
Universal and rapid method for purification of GFP-like proteins by the ethanol extraction.
Protein Expr Purif. 2009 May;65(1):108-13
pmid: 19084068
- Mocz G.
Fluorescent proteins and their use in marine biosciences, biotechnology, and proteomics.
Mar Biotechnol (NY). 2007 May-Jun;9(3):305-28
pmid: 17372780
- Remington SJ.
Fluorescent proteins: maturation, photochemistry and photophysics.
Curr Opin Struct Biol. 2006 Dec;16(6):714-21
pmid: 17064887
- Wolff M, Wiedenmann J, Nienhaus GU, Valler M, Heilker R.
Novel fluorescent proteins for high-content screening.
Drug Discov Today. 2006 Dec;11(23-24):1054-60
pmid: 17129823
- Giepmans BN, Adams SR, Ellisman MH, Tsien RY.
The fluorescent toolbox for assessing protein location and function.
Science. 2006 Apr 14;312(5771):217-24
pmid: 16614209
- Bulina ME, Chudakov DM, Britanova OV, Yanushevich YG, Staroverov DB, Chepurnykh TV, Merzlyak EM, Shkrob MA, Lukyanov S, Lukyanov KA.
A genetically encoded photosensitizer.
Nat Biotechnol. 2006 Jan;24(1):95-9
pmid: 16369538
- Bulina ME, Lukyanov KA, Britanova OV, Onichtchouk D, Lukyanov S, Chudakov DM.
Chromophore-assisted light inactivation (CALI) using the phototoxic fluorescent protein KillerRed.
Nat Protoc. 2006;1(2):947-53
pmid: 17406328
Информация для заказа
|
