Определение единицы измерения
Одна единица определяется как количество фермента, которое высвобождает 1,0 мкмоль ненасыщенных олигосахаридов из гепарансульфата в минуту при 30°C и pH 7,0 в общем реакционном объеме 100 мкл.
Анализ определения единиц:
двукратные разведения Bacteroides Heparinase III инкубируют с 1 мг/мл гепарансульфата слизистой оболочки свиньи в 1X реакционном буфере Bacteroides Heparinase в 100 мкл реакционной смеси. Реакционную смесь инкубируют при 30°С. Высвобождение ненасыщенных олигосахаридов обнаруживают с помощью УФ-спектроскопии в реальном времени при 232 нм.
Условия реакции
1X буфер для реакции Bacteroides Heparinase
Инкубировать при 30°C
Буфер хранения
20 мМ Трис-HCl
100 мМ NaCl
5 мМ CaCl 2
1 мМ ЭДТА
pH 7,5 при 25°C
Тепловая инактивация
100°C в течение 1 минуты
Молекулярная масса
Видимый: 75 кДа