Трансфекция
Трансфе́кция — процесс введения нуклеиновой кислоты в клетки эукариот невирусным методом.
Одним из самых дешёвых методов является кальций-фосфатная трансфекция. Изотонический раствор, содержащий буфер HEPES, фосфат и ДНК, смешивают с хлористым кальцием. Образуется осадок из частиц фосфата кальция и ДНК, размер которых лежит в нанометровом диапазоне. Суспензию добавляют к культуре клеток, после чего нуклеиновые кислоты проникают в клетки. Однако эффективность такого метода не очень высокая.
Более эффективным методом является использование липосом. Липосомы по размерам намного меньше клеток, состоят из липидной мембраны, которая окружает ДНК. Они могут сливаться с клеточной мембраной, после чего их внутреннее содержимое сливается с содержимым клеток.
Ещё один метод трансфекции — использование положительно заряженных водорастворимых полимеров, таких как ДЭАЭ-декстран или полиэтиленимин. Отрицательно заряженная ДНК связывает поликатионы, и образовавшийся комплекс поглощается клетками путём эндоцитоза.
Так же трансфекцию можно профести с помщью электропорации, нуклеофекции, теплового шока и т.д.
Информация для заказа
|