Анализ межмолекулярных взаимодействий
Системы анализа межмолекулярных взаимодействий ForteBio (Pall) основаны на технологии интерферометрии слоя биомолекул (Bio-Layer Interferometry — BLI), которая позволяет производить изучение свойств биомолекул (белки, НК) в режиме реального времени, без использования красителей и меток. Суть данной технологии сводится к анализу интерференционных паттернов белого света, отраженного от 2-х поверхностей: слой с иммобилизованными белками на поверхности биосенсора и внутреннего контрольного слоя (рис.1). Любое изменение количества молекул, связанных на поверхности биосенсора, проявляется в виде сдвига интерферентного паттерна, который можно зарегистрировать в режиме онлайн (рис 2).
Связывание между лигандом, иммобилизованным на поверхности биосенсора, и аналитом в растворе приводит к изменению толщины слоя молекул на поверхности биосенсора, что приводит к сдвигу длины волны, Δλ (рис.3), который пропорционален изменению толщины биослоя на поверхности биосенсора. Эти изменения могут регистрироваться в режиме реального времени, что обеспечивает возможность изучения процессов взаимодействия биомолекул в динамике.
Безмаркерная технология определения концентрации белков BLI является великолепной заменой таким рутинным процедурам, как ИФА, а также великолепно дополняет такие методы анализа как:
- мультиплексный анализ с использованием технологии xMap;
- масс-спектрометрию MALDI;
- иммуноблоттинг.
Преимущества безмаркерной технологии измерения BLI:
- высокая скорость — анализ 1 образца за 5 секунд;
- простота в эксплуатации;
- не требует специальных меток или красителей;
- минимальная чувствительность к примесям;
- возможность квалификации IQ/OQ.
|
 |
|
Поверхностно-плазмонный резонанс (Surface Plasmon Resonance — SPR) — это методика изучения межмолекулярных взаимодействий, основанная на изменении оптических характеристик поляризованного луча, отражённого от поверхности позолоченной пластины и обладающего определенным углом отражения. При изменении слоя молекул, нанесённых на поверхность пленки металла, происходит изменение свойств отражённого луча.
Системы Pioneer основаны на методе SPR, что позволяет применять их для таких задач, как измерение кинетики (ka, kd) и аффинности (KD) межмолекулярных взаимодействий широкого ряда биологических молекул в течении минуты.
По сравнению с технологией BLI, технология SPR позволяет характеризовать сверхмалые молекулы массой менее 150 Да. |
Информация для заказа
|
