Лабораторная диагностика «Атипичной пневмонии» (SARS) методом ПЦР
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
У Т В Е Р Ж Д А Ю
Первый заместитель Министра
здравоохранения Российской Федерации,
Главный государственный санитарный врач
Российской Федерации.
Г.Г. Онищенко
3 мая 2003 г.
Лабораторная диагностика «Атипичной пневмонии» (SARS) методом ПЦР
Временные методические рекомендации
Аннотация
В настоящих методических рекомендациях приводятся правила организации и выполнения генодиагностических исследований при лабораторной диагностике синдрома острого респираторного заболевания (атипичной пневмонии - SARS). Рекомендации предназначены для специалистов научно-исследовательских противочумных институтов, противочумных станций и других учреждений, применяющих метод ПЦР для обнаружения ДНК возбудителей инфекционных заболеваний I-II групп патогенности.
Разработаны:
Министерством здравоохранения Российской Федерации (Федоров Ю.М., Жилина Н.Я.) Российским НИПЧИ "Микроб" (Кутырев В.В., Куличенко А.Н., Дроздов И.Г., Шарова И.Н., Осина Н.А., Гаранина С.Б., Ляпин М.Н.)
Вирусологическим центром НИИ микробиологии Минобороны России (Максимов В.А., Марков В.Н.) ГНЦ вирусологии и биотехнологии "Вектор" (Терновой В.А., Рудзевич Т.Н., Максимов Н.Л., Игнатьев Г.М., Нетесов С.В.)
Введение
- Настоящие методические рекомендации определяют временный порядок и правила проведения лабораторных исследований по специфической детекции РНК коронавирусов, вызывающих синдром острого респираторного заболевания, или атипичную пневмонию, или SARS (далее по тексту SARS) до завершения разработки и внедрения в практику диагностических препаратов к вирусу SARS.
- Рекомендации разработаны для специалистов противочумных институтов, противочумных станций и других учреждений, осуществляющих лабораторную диагностику SARS, в соответствии с "Временной инструкцией по лабораторной диагностике синдрома острого респираторного заболевания (атипичной пневмонии) (SARS)" (письмо Первого заместителя Министра здравоохранения Российской Федерации от 21.04.03 г.).
- Инкубационный период SARS составляет 2-14 суток, в среднем 7-10 суток, лихорадочный период - до 10-14 суток. РНК вируса методом ПЦР выявляют в биологических жидкостях: крови, мокроте, смывах носоглотки на 1-10 сутки заболевания.
- В связи с существенными трудностями в культивировании и выделении коронавирусов, методы генодиагностики являются в настоящее время ведущими в подтверждении связи заболевания "атипичной пневмонией" с вирусом SARS. Принцип метода состоит в направленной амплификации кДНК, синтезируемой с помощью обратной транскриптазы, на основе специфичного фрагмента РНК вируса. С целью повышения достоверности анализа рекомендуется проведение ПЦР с двумя парами праймеров (используются раздельно).
- В методических рекомендациях представлены протоколы ПЦР, основанные на рекомендациях ВОЗ, до появления первых случаях заболеваний "атипичной пневмонии" в России. Протоколы могут быть модифицированы в дальнейшем, по мере изменения ситуации.
- В соответствии с "Временной инструкцией" … вирус SARS отнесён к II группе патогенности. С учётом отсутствия регламентированных методов инактивации вирусов при исследованиях проводимых методом ПЦР и доказанной высокой опасности заражения медицинского персонала вся работа проводится с тщательным соблюдением мер биобезопасности регламентированных СП 1.2.011-94 "Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности" и СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности".
… |
