Инструкция по выделению и хранению концентрата стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека

Зарегистрировано в Минюсте РФ 1 августа 2003 г. N 4939
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Приложение N 2
Утверждено
Приказом
Минздрава России
от 25 июля 2003 г. N 325

Инструкция по выделению и хранению концентрата стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека

Выделение и хранение концентрата стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека обеспечивает Банк стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека (далее Банк СК).

При поступлении в Банк СК образца пуповинной/плацентарной крови проводятся:

1. Определение количества CD34+ клеток
2. Определение количества ядросодержащих клеток
3. Типирование по антигенам гистосовместимости 1 и 2 класса: HLA-A, В и DR.
4. Определение группы крови по системе АВО и резус-фактора.
5. Тестирование на инфекционные агенты:
   • Anti-HIV-1 и -2, HIV1-Ag
   • Anti-HTLV-I и -II
   • Anti-HBcor-Ag, HBs-Ag
   • Anti-HCV
   • Anti-CMV
   • Anti-Toxoplasma gondii
   • RW
   • Staphilococci
   • Streptococci
   • Enterococci
   • Neisseria gonorrheae
   • Candida species
   • Aspergillus species
   • Esherihia coli.

Выделение концентрата стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека в виде фракции, обогащенной мононуклеарами, проводится в стерильной закрытой системе для переработки и хранения плацентарной/пуповинной крови, которая асептически соединяется с закрытой донорской системой (пластиковым мешком) с образцом пуповинной/плацентарной крови.

Концентрат стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека оценивается по количеству ядросодержащих клеток.

Смешивание концентрата стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека с криопротектором: применяется высокоочищенный диметилсульфоксид (ДМСО), в том числе в комбинации с декстраном.

Криомешок с концентратом стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека, предназначенный для криозамораживания и криохранения, маркируется идентификационным номером с указанием концентрации и состава криопротектора, даты криозамораживания, названия Банка СК.

Криомешок с концентратом стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека герметично запечатывается в криопротективный тефлоновый пластик.

Криозамораживание концентрата стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека осуществляется в соответствии с Протоколом Банка СК, согласованным с Минздравом России.

Концентрат стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека после криозамораживания помещается на временное (до 6 месяцев) криохранение при температуре, не превышающей -150 град.С, в карантинный дюар в жидкую фазу азота.

Результаты всех исследований, характеризующие образец заготовленной пуповинной/плацентарной крови и полученный концентрат стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека, вносятся в базу данных Банка СК под единым идентификационным номером образца.

Отдельно, для возможных дополнительных исследований, хранится образец выделенных клеток, так называемый "спутник", под тем же идентификационным номером.

По истечении карантинного срока хранения (6 месяцев) концентрат стволовых клеток пуповинной/плацентарной крови человека переносится на длительное хранение при температуре, не превышающей -150 град. С, в дюар с жидким азотом при условии отрицательных результатов тестирования (Анти-HIV-1 и -2, HIV-1Ag, Анти-HTLV-I и -II, Анти-HbcorAg, HBs-Ag, Анти-HCV).