ТестГен

С помощью тест-систем производства ООО «ТестГен» для детекции мутаций в генах EGFR и KRAS выполняется часть анализов в  РФ, эти наборы успешно прошли внешний контроль качества в европейских организациях (European Molecular Genetics Quality Network для EGFR и Pathologisches Institut для KRAS). Контроль качества выполнялся на базе молекулярно-диагностической лаборатории ГАУЗ «Республиканский клинический онкологический диспансер» Министерства Здравоохранения Республики Татарстан.

Определение статуса мутаций в генах EGFR и KRAS является чрезвычайно важным при выборе лекарственной терапии для уверенности в том, что пациенты получают лечение в соответствии с молекулярными особенностями своего заболевания. В наборах полностью отсутствуют такие недостатки других подходов, как необходимость количественной калибровки образца ДНК, наличие неспецифического сигнала при отсутствии мутации, субъективность анализа результатов, ложноположительные результаты при превышении рекомендуемых для анализа количеств материала.

Применяемый в наборах вариант технологии TaqMan на основе разрушаемых олигонуклеотидных зондов с химическими модификациями LNA (locked nucleic acids) обладает высокой чувствительностью и специфичностью. В зависимости от общего количества ДНК в образце определяется до 1% мутантной ДНК на фоне геномной ДНК дикого типа с точностью не менее 99,9%. Характеристики наборов позволяют воспроизводимо выявлять мутации, присутствующие в образце в низкой концентрации, сводя к минимуму вероятность ложноотрицательных результатов.

Наборы совместимы со всеми распространенными реал-тайм амплификаторами: ABI 7300/7500/StepOne, Bio-Rad iQ5/CFX, Rotor-Gene 3000/6000, ДТ-96 и т.д.

Наборы позволяют проводить детекцию непосредственно в ткани опухоли при использовании биопсийного материала. Версия наборов для детекции циркулирующей опухолевой ДНК позволяет проводить анализ плазмы или сыворотки пациента.

Наборы для диагностики онкологических заболеваний

В мире рак предстательной железы (РПЖ)  занимает 3-4 место в структуре заболеваемости злокачественными  новообразованиями,  более 600 тыс. случаев ежегодно. В США находится на 1 месте по заболеваемости – более 200 тыс. больных в год. В Европе занимает 1-2 места (более 200 тыс. больных в год).

«Проста- тест» (PCA3) предназначен для неинвазивной диагностики рака предстательной железы (РПЖ) путём определения уровня экспрессии гена PCA3 методом обратной транскрипции и последующей количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Материалом для проведения ПЦР служат пробы РНК человека из образцов свежего или фиксированного в среде для стабилизации и сохранения РНК осадка мочи, полученной после массажа простаты, чем достигается отсутствие инвазивности.

Результат анализа  «Проста- тест» (PCA3) выраженный количественно, указывает на риск наличия у пациента рака предстательной железы и может, наряду с определением уровня простатического специфического антигена в крови, результатов УЗИ (ТРУЗИ), МРТ, КТ и пальцевого ректального исследования простаты, служить дополнительным критерием при назначении пациенту первой или повторной биопсии предстательной железы.

Наборы для выделения нуклеиновых кислот

Этап пробоподготовки имеет огромное значение для получения правильных результатов ПЦР-анализа. Поэтому очень важно использовать в работе проверенные надёжные реактивы для выделения нуклеиновых кислот. Только оптимальная концентрация и высокое качество нуклеиновых кислот позволяют на 100% раскрыть потенциал любого метода ПЦР диагностики.

 ООО «ТестГен» производит наборы для выделения ДНК, основанные на двух подходах:

• колоночный метод;
• магнитный метод, с применением магнитных микрочастиц.

Наборы сокращают время выделения ДНК, - это удобно для специалистов и пациентов и не требуют покупки дополнительного оборудования, что выгодно для учреждения.

«ДНК-плазма»

Набор предназначен для выделения циркулирующей ДНК из плазмы. Применяется для пренатальных неинвазивных исследований, а также в онкологии.

«ДНК-плазма» - выделение ДНК из 1мл «ДНК-плазма-1»и из 2 мл “ДНК-плазма-2” плазмы крови.

«ДНК-ткань-Ф» - набор предназначен для выделения ДНК из тканей, фиксированных формалином и заключенных в парафин.

«ДНК-кровь» - набор предназначен для выделения и очистки общей ДНК из цельной крови, плазмы, сыворотки, лейкоцитов, лимфоцитов, буккального эпителия, культур клеток, мазков.

Выделенная ДНК пригодна для HLA-типирования, исследования различных мутаций и полиморфизмов в геноме методами ПЦР, секвенирования, масс-спектрометрии.

«ДНК-плазма-М» - набор предназначен для выделения циркулирующей ДНК из плазмы крови. За счет отсутствия необходимости в центрифугировании позволяет провести процедуру выделения ДНК за 30 минут.

«ДНК-плант» - набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из растительных продуктов и сырья.

Комплект реагентов, предназначенный для получения препарата ДНК из  растительного сырья (листья, проростки, клубни, бобы, зерна), из продукции растениеводства (мука, крупа),из продуктов питания, содержащих компоненты растительного происхождения (заменители молока, печенье, хлопья).

Выделение ДНК осуществляется с целью последующего анализа методом полимеразной цепной реакции, NGS и т.д.

Метод выделения ДНК основан на обратимом связывании нуклеиновых кислот на поверхности магнитных частиц. Позволяет проводить всю процедуру выделения непосредственно в пробирке на 1,5 мл. Предназначен для эффективного и быстрого (~60 мин) выделения ДНК из продуктов растительного происхождения и сырья. Выделенная ДНК может использоваться для постановки ПЦР и для любых других генетических анализов. Протокол выделения адаптирован для станции автоматического выделения ДНК Tekan. Протокол выделения ДНК может быть масштабирования для получение большего количества ДНК.

Набор реагентов для генотипирования полиморфных маркеров и мутаций

ООО «ТестГен» осуществляет разработку тест-систем для молекулярно-генетических исследований в области моногенных и многофакторных наследственных заболеваний, онкологии и пренатальной диагностики, основанные на распространенных в лабораториях надежных методиках: ПЦР "в реальном времени" и ПЦР с последующим секвенированием.

В ООО «ТестГен» разработаны как аналоги широко известных за рубежом наборов TaqMan® SNP Genotyping Assays от Applied Biosystems (метод флуоресцентной детекции по конечной точке), так и собственные тест-системы (метод электрофоретической детекции и метод флуоресцентной детекции в процессе проведения аллель-специфичной амплификации) для амплификаторов в реальном времени, таких как ABI 7300, ABI 7500, Bio-Rad iCycler, Rotor-Gene 3000/6000 и/или агарозных/акриламидных гелей.

Каждый набор рассчитан на проведение 600 реакций ПЦР (анализ 400 клинических образцов ДНК пациентов с учетом отрицательных контролей и контролей прохождения ПЦР). Метод: для анализа данных полиморфных маркеров: используется метод флуоресцентной детекции на основе разрушаемых олигонуклеотидных зондов с использованием синтетических аналогов олигонуклеотидов. Для ПЦР используется допускающая замораживание готовая смесь, содержащая, dNTPs, Mg2+ и реакционный буфер с праймерами и зондами. Для ПЦР используется ДНК полимераза с «горячим стартом».

Анализу подвергается геномная ДНК человека, выделенная из слюны, крови или другого биологического материала.