Технология GEM (Global Eukaryotic Microcarrier)
Микрочастицы GEM - Global Eukaryotic Microcarrier – новое поколение культуральной поверхности для выращивания трансформированных, первичных и стволовых клеток. Альгинат и адгезивные молекулы на моверхности частиц GEM позволяют преобразовать прикрепленные клетки в пипетируемый субстрат с магнитными свойствами. Все клетки или часть культуры можно раскапывать, переносить, и проводить манипуляции, как с реагентами при проведении исследований. Используя магниты CubeMagnet/BioMagnet, можно перемещать клетки в любых направлениях. Не извлекая их из культуры, можно производить трансфекцию, криоконсервацию, анализ и флюоресцентное мечение и даже вырастить следующее поколение культуры.
Преимущества GEM
Технология GEM (Global Eukaryotic Microcarrier) разработана для закрепления уникального фенотипа используемой вами клеточной линии в процессе культурального транспорта при разработке лекарственных веществ. Субстрат GEM поддерживает клеточную культуру высокой плотности в системе BioLevitator. Как магнитный микроноситель, GEM может быть использован в процессе обмена среды и накопления численности (culture harvesting).
|
|
Поверхность из альгината
Частицы GEM покрыты альгинатом, имеющим поры и обладающим свойством упругости. Это способствует полярности клеток и обеспечивает им метаболизм, сравнимый с условиями in vivo.
|
|
Площадь поверхности
Частица GEM имеет диаметр 75 - 150 мкм, округлую поверхность и пригодна для пипетирования. Небольшой диаметр микросфер также увеличивает соотношение площадь поверхности/объем в компактном масштабе культивирования.
|
|
Отсутствие аутофлюоресценции субстрата (non-autofluorescent substrate)
Частицы GEM оптически чистые и не имеют аутофлюоресценции, что делает возможным изучение трехмерного изображения, абсорбцию и люминесцентный анализ непосредственно на микроносителях.
|
|
Магнитные частицы
Альгинатовая поверхность частиц совместно с магнитной составляющей частиц облегчают процессы культивирования и анализа. Частицы GEM можно гомогенизировать с осторожностью; они легко переносят процедуры смены среды и пересева.
|
|
Протеиновая оболочка
Частицы GEM покрыты тонким молекулярным слоем желатина; это делает их поверхность подходящей для разных типов клеток. Дополнительное покрытие частиц такими веществами, как ламинин, необходимо для прикрепления уникальных клеток, таких как первичные (primary) и стволовые клетки.
|
|
Сбор клеток с использованием пробирок LeviTube и реагента Accutase
В состав набора включен диссоциирующий агент Accutase. Несмотря на рекомендацию держать клетки на частицах GEM на протяжении всего цикла – от культивации до использования, может возникнуть необходимость в получении клеточной суспензии. Реагент Accutase является альтернативой трипсину, он деликатно воздействует на клетки и не требует "гашения" сывороткой. Если есть необходимость в клеточной суспензии для проточной цитометрии, вы можете воспользоваться реагентом Accumax, который сочетает в себе диссоциирующие свойства реагента Accutase с ингибированием слипания клеток в растворе.
|
|
Протоколы
GEM Kit Application Notes
Adhesion Assay Kit Application Note 07.27.10
Adhesion Assay Protocol 07.27.10
Neuroscience Starter Kit Application Note 07.27.10
Primary Cell Starter Kit Application Note 07.27.10
Stem Cell Starter Kit Application Note 07.27.10
General BioLevitator Application Notes
Counting for LeviTube
Harvesting in LeviTube
General GEM Application Notes
Culturing Cells Using the GEM Protocol 07.28.10
Hoechst Staining Cells on GEM Protocol 07.28.10
Immunohistochemical Staining of Cells on GEM Protocol 07.28.10
Чтобы узнать подробности о Микрочастицах GEM или получить всестороннюю информацию, пожалуйста, обращайтесь к нашим менеджерам (написать письмо).
Публикации по данной тематике
Badr NA, Justice BA, and Felder RA. Automated Cell Culture with 3-D Substrate. Genetic Engineering & Biotechnology News. Oct 15, 2009 (Vol. 29, No. 18)
Flanagan, N. 3-D Cell Culture for Discovery & Bioprocess. Genetic Engineering & Biotechnology News. Sep 15, 2009 (Vol. 29, No. 16).
Badr NA, Justice BA, Machleidt T, and Felder RA. 3-Dimensional Cell Culture: A Novel Cell Substrate Enables Modernization of Culture. Screening: Trends in Drug Discovery, Issue 4, 2009, pgs 26-27.
Justice BA, Badr NA, and Felder RA. 3D cell culture opens new dimensions in cell-based assays. Drug Discovery Today, Volume 14, Issues 1 and 2, January 2009, pgs 102-107.
Blow N. Stem cells: finding the right path. Nature Methods, Vol 5, No 12, 2008, pgs 1061 – 1068.
Презентации
ISSCR 8th Annual Meeting International Society for Stem Cell Research June 16-19, 2010
Moscone West, San Francisco, CA USA
Hamilton Robotics Booth 529/531
Posters
Automated 3D Culture of undifferentiated hESC
Reprogramming towards induced pluripotency in a 3D Culture system
2nd International Conference on Stem Cell Engineering Society for Biological Engineering May 2-5, 2010 Hyatt Harborside Hotel, Boston, MA
Poster
Magnetic Alginate Microcarriers for the Expansion of Human Embryonic Cells, Anastasie Kweudjeu (1) and Nadia Badr (2)
(1) Stem Cell and Regenerative Biology (SCRB), Harvard University, Cambridge, MA (2) Global Cell Solutions, Inc., Charlottesville, Virginia
ISSCR 7th Annual Meeting International Society for Stem Cell Research July 8-11, 2009 Centre Convencions Internacional Barcelona, Spain
Poster Presentation: Automated 3D Culture of Neural Stem Cells, A. Keric 1, S. Haupt 1, C. Cavelier 2, Brad Justice 3 & O. Brьstle
LabAutomation 2009 Association for Laboratory Automation January 25 - 29, 2009 Palm Springs Convention Center, Palm Springs, CA Global Cell Solutions Booth 543 Hamilton Company Booth 305 3D Automated Cell Culture Using Existing Hamilton Platform Technologies
|