Счетчики клеток, анализаторы жизнеспособности

• Счетчики клеток Luna

В современной клеточной биологии и цитологии зачастую требуется оценить комплекс параметров, характеризующих жизнеспособность различных типов клеточных популяций. Определение жизнеспособности клеток необходимо для оценки их морфологической целостности, например, после вывода клеточной линии из криоконсервации, а также для изучения влияния различных видов воздействия (различных условий культивирования, действия токсинов, фармакологических препаратов, различных патогенных факторов и т. д.) на клетку.

Под жизнеспособностью клеток понимают способность клеток поддерживать состояние, необходимое для выполнения ими специфических функций, так и возможность реализации митотического потенциала клетками, способными к делению (Герасимов, Попандопуло, 2007). Существует несколько различных методов, позволяющих оценить жизнеспособность клеточной культуры или образца ткани, применяющихся в зависимости от конкретной задачи исследования. Их можно условно разделить на следующие группы:

1. Оценка целостности морфологической структуры клеток (неспецифическая оценка жизнеспособности).

2. Оценка метаболической активности клеток.

3. Оценка пролиферативной активности.

4. Оценка функциональной активности клеток in vitro.

Счетчики клеток, анализаторы жизнеспособности — это оборудование, которое дает представление о количественном составе клеточной суспензии и выявлении жизнеспособных клеток популяции.

Под жизнеспособностью понимают способность клеток поддерживать состояние, необходимое для выполнения специфических функций, а также возможности реализации митотического потенциала.

Существующие методы для оценки жизнеспособности клеток условно можно разделить на следующие группы:
1) оценка целостности морфологической структуры клеток;
2) оценка активности внутриклеточных ферментов:

• определение митохондриальной активности клеток (MTT-тест), основанное на реакции восстановления (4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Нтетразолиум бромида (МТТ) клеточными оксиредуктазами;
• определение активности лактатдегидрогеназы (LDH-тест);

3) специфические тесты, например, пересев клеток после инкубирования с токсикантом для определения приживаемости и т.д.

Выбор того или иного метода напрямую зависит от задач исследования.

В качестве красителя чаще используют трипановый синий. Также можно использовать флуоресцентные красители, такие как пропидиум йодид, DAPI, акридиновый оранжевый.

При ручном анализе результаты окрашивания ведутся с помощью микроскопии в камере Горяева. Оценивается доля мертвых клеток по отношению к общему их числу.

Анализаторы жизнеспособности клеток позволяют автоматизировать данный процесс. Они работают по принципу окраски клеток красителем с последующим анализом и подсчетом общего количества клеток и оценкой жизнеспособных клеток. В зависимости от модели анализаторы также могут быстро определить и исследовать условия, которые негативно влияют на жизнеспособность клеток, и следить за экспрессией флуоресцентных белков.

В исследованиях, где основной задачей стоит только подсчет клеток, и разделение их по размеру, можно использовать автоматические счетчики.

Счетчик клеток работает по принципу Культера, основанном на изменении электрических импульсов, возникающих при прохождении клеток через электрочувствительную зону апертуры счетного элемента прибора.

Счетчики клеток могут быть портативными для оперативного измерения количества клеток и анализа популяций в суспензии по размеру и клеточному объему, а также с более расширенным функционалом, когда необходимо провести более детальный анализ популяций клеток.

Счетчики и анализаторы жизнеспособности используются в биотехнологических исследованиях при мониторинге ключевых параметров клеточных культур, что позволяет быстро определять и корректировать условия культивирования, регистрировать полученные данные.

тандартным методом определения жизнеспособности клеток является оценка их целостности. Данный метод заключается в визуализации и распознавании клеток после их окраски специальными красителями, которые при повреждении клеточной стенки проникают во внутрь клетки. При этом окрашенные клетки признаются не жизнеспособными.

Наименование	Объем	Производство	Метод	Кат.Номер
Камера счетная McMaster 2 сетки		Marienfeld		0611240
Счетчик и анализатор жизнеспособности клеток, 6-50 мкм, TC20, набор на 30 измерений, термопринтер, Bio-Rad		Bio-Rad		1450103
Счётчик колоний микроорганизмов СКМ-2		STEGLER		00000032411
Счетчик форменных элементов крови, 24 канала, С-5		---		ГПН0007